Rnk hepatito c virusas kas tai yra

Share Tweet Pin it

Hepatito C virusas (HCV) sukelia apie 20% ūminio hepatito, 60-70% lėtinio hepatito ir apie 30% cirozės ir kepenų vėžio. 1989 m. Atrasta HCV yra Togaviridae genties Flavivirus genties RNR virusas, kurio dydis yra 40-60 nm, o lipidų kiekis vyrauja. Yra mažiausiai 6 genotipo ir 50 serotipų HCV. HCV genotipo ar serotipo (specifinių genotipo antikūnų) žinojimas yra naudingas rekomenduojant ir skiriant gydymą. HCV perduodamas per kontaktą su užterštu krauju ar kraujo užterštas preparatų: kraujo perpylimo, kad adatų ir švirkštų naudojimo po kito asmens be sterilizacija ar blogai sterilizuotus, tatuiruotės, vakcinacija unsterilized dalijimąsi įranga šepetėlis skutimosi reikmenys, pincetai, manikiūras rinkinys. Pateikiama biologinėse terpėse (seilėse, piene, makšties išmetimuose, spermae ir kt.), Bet mažesne koncentracija negu virusas B. Gali būti perduodama iš motinos į vaisius. Nustatyta, kad vertikalaus perdavimo lygis nėščioms moterims, kurių anti-HCV teigiamas, yra 2,7-4,4%. Nėščių moterų, sergančių HCV-ŽIV infekcija, šis skaičius siekia 5,4-8,6 proc. Maždaug 85% ūminės formos tampa lėtinės. Kepenų cirozė (vidutiniškai per 30 metų) gali sukelti hepatoceliulinę karcinomą, o 1-5% pacientų yra užsikrėtę HCV.


Ligos atsiradimas yra klastingas, virusas vadinamas laiko bomba ar švelnus žudikas. Serologiniai langai tarp HCV buvimo ir anti-HCV aptikimo skiriasi skirtingiems pacientams. Dabartiniai imunologiniai tyrimai vidutiniškai nustato antikūnus po 7-8 savaičių nuo ligos pradžios. Spontaninio regeneravimo atveju anti-HCV gali išlikti per visą gyvenimą arba palaipsniui išskaidyti keletą metų. Lėtinis anti-HCV infekcija sergantiems pacientams tęsiasi neribotą laiką. Tarp gyventojų, kuriems yra mažesnė rizika, diagnozuojamų žmonių skaičius yra 0,5-1%.


HCV RNR analizė (hepatito C viruso RNR apibrėžimas), dažnai vadinamas hepatito C PCR tyrimu, yra kraujo tyrimas, leidžiantis tiesiogiai identifikuoti hepatito viruso genetinę medžiagą (kiekvienas virusas yra viena RNR dalelė). Šis bandymas dažniausiai atliekamas naudojant PCR metodą, taigi ir hepatito C PCR pavadinimas. Yra kokybiniai ir kiekybiniai HCV RNR tyrimai.


Kokybinė analizė rodo, kad virusas yra kraujyje. Šis bandymas turėtų būti atliekamas visiems pacientams, kuriems nustatyta hepatito C antikūnų. Jo rezultatas gali būti aptiktas arba jo nenustatyta. Standartinės vertės (vertė, kuri turėtų būti normali) - nenustatyta. Rasti rezultatas gali rodyti, kad virusas dauginasi ir užkrečia visas naujas kepenų ląsteles. Kokybinis PGR tyrimas turi tam tikrą jautrumą. Tai reiškia, kad jei virusas egzistuoja kraujyje labai mažoje koncentracijoje (žemiau metodo jautrumo ribos), rezultatas negali būti pasiektas. Todėl, atliekant aukštos kokybės PGR pacientams, sergantiems maža viremija (viruso koncentracija), pavyzdžiui, atliekant antivirusinį gydymą, svarbu žinoti diagnostikos sistemos jautrumą. Norint kontroliuoti virusologinį atsaką antivirusinio gydymo metu, pageidautina naudoti diagnostinę sistemą, kurios jautris yra bent 50 TV / ml.

Pasiruošimas pacientui: Kraujo donorystė

Medžiaga: Kraujo plazma.

Hepatito C viruso RNR kiekybinis nustatymas

Kas yra hepatito C RNR kiekybinis?

Kiekybinis hepatito RNR nustatymas PCR.

Analitiniai rodikliai: hepatito C viruso RNR nustatymas polimerazės grandinine reakcija (PGR) ir viruso kiekio nustatymas kraujo plazmoje.

Nustatomas fragmentas yra konservatyvus hepatito C viruso genomo regionas. Nustatymo specifiškumas yra 98%. Aptikimo jautrumas yra 600 TV / ml viruso dalelių kraujyje.

Kodėl svarbu atlikti hepatito C viruso RNR kiekybinį įvertinimą?

Klinikinių imčių hepatito C viruso RNR kiekybinis apibūdinimas yra svarbus vertinant antivirusinio gydymo veiksmingumą ir turi prognostikos reikšmės nustatant šio hepatito chroniškumą. Jei viruso koncentracija yra mažesnė kaip 8x105 TV / ml (2x106 kopijų / ml), tada gydymo kurso prognozė yra palanki, jei ji yra didesnė, tada rekomenduojama vartoti kitus gydymo būdus. Virusinė apkrova yra mažesnė nei 8x105 TV / ml (2 x 10 kopijų / ml), kartu su viruso genotipo nustatymu yra nepriklausomas ir tiksliausias gydymo veiksmingumo parametras. Trečios dienos nuo gydymo pradžios 85 proc. Sumažėja hepatito C viruso RNR koncentracija yra greitas ir tikslus parametras, kuriuo galima prognozuoti gydymo efektyvumą, dėl kurio ankstyvas virusologinis atsakas.

Kokie simptomai yra hepatito C viruso RNR kiekybiškai?

Analizės nuorodos:

  • Teigiamas kokybinis serumo hepatito C viruso RNR tyrimas.
  • Nustatyti pacientų gydymo taktiką.
  • Tikslus gydymo veiksmingumo vertinimas.

Ar kažkas tau kelia nerimą? Ar norite sužinoti išsamesnės informacijos apie hepatito C viruso RNR, kiekybinį įvertinimą ar kitas analizes? Ar jums reikia kreiptis į gydytoją? Galite susitikti su gydytoju - "Eurolab" klinika visada yra Jūsų paslaugoms! Geriausi gydytojai jus apžiūrės, patars, teiks reikalingą pagalbą ir diagnozės nustatymą. Jūs taip pat galite paskambinti į gydytoją namuose. "Eurolab" klinika veikia visą parą.

Kaip susisiekti su klinika:
Telefono numeris mūsų klinikoje Kijeve: (+38 044) 206-20-00 (daugiakanalis). Klinikinės sekretorius parinks jus patogią dieną ir vizito į gydytoją laiką. Čia rodomos mūsų koordinatės ir kryptys. Išsamią informaciją apie visas klinikinės paslaugos ieškokite savo asmeniniame puslapyje.

Jei anksčiau atlikote bet kokius tyrimus, būtinai atlikite jų konsultacijas su gydytoju. Jei tyrimai nebuvo atlikti, mes padarysime viską, kas reikalinga mūsų klinikoje, ar su kitais klinikomis.

Turite būti labai atsargūs dėl savo bendros sveikatos. Yra daugybė ligų, kurios iš pradžių pasireiškia ne mūsų kūne, bet galų gale paaiškėja, kad, deja, jau yra per vėlu išgydyti. Norėdami tai padaryti, gydytojas turi būti tikrinamas kelis kartus per metus. ne tik užkirsti kelią baisioms ligoms, bet ir išlaikyti sveiką protą kūne ir visame kūne.

Jei norite užduoti klausimą gydytojui, naudokite internetinį konsultacijų skyrių. Galbūt čia rasite atsakymus į savo klausimus ir skaitykite patarimų, kaip rūpintis savimi. Jei jus domina atsiliepimai apie klinikas ir gydytojus - pabandykite rasti reikiamą informaciją forume. Taip pat užsiregistruokite "Eurolab" medicinos portale. laikytis naujausių naujienų ir atnaujinimų svetainėje apie hepatito C viruso RNR, kiekybinį įvertinimą ir kitas svetainės analizes, kurios bus automatiškai išsiųstos jums paštu.

Jei jus domina bet kokie kiti klinikų tyrimai, diagnostika ir paslaugos ar turite kitų klausimų ir pasiūlymų, parašykite mums. mes stengiamės jums padėti.

PGR analizė

HCV RNR analizė (hepatito C viruso RNR apibrėžimas), dažnai vadinamas hepatito C PCR tyrimu, yra kraujo tyrimas, leidžiantis tiesiogiai identifikuoti hepatito viruso genetinę medžiagą (kiekvienas virusas yra viena RNR dalelė). Šis bandymas dažniausiai atliekamas naudojant PCR metodą, taigi ir hepatito C PCR pavadinimas. Yra kokybiniai ir kiekybiniai HCV RNR tyrimai.

Kokybinė analizė rodo, kad virusas yra kraujyje. Šis testas yra būtinas visiems pacientams, kuriems nustatyta hepatito C antikūnų. Jo rezultatas gali būti "aptiktas" arba "neaptiktas". Standartinės vertės (vertė turėtų būti normali) - "neaptiktos". "Aptiktų" rezultatas gali reikšti, kad virusas dauginasi ir užkrečia visas naujas kepenų ląsteles. Kokybinis PGR testas turi tam tikrą jautrumą (10-500 TV / ml.). Tai reiškia, kad jei virusas yra kraujyje labai mažoje koncentracijoje (žemiau metodo jautrumo ribos), rezultatas gali būti "neaptiktas". Todėl, atliekant aukštos kokybės PGR pacientams, sergantiems maža viremija (viruso koncentracija), pavyzdžiui, atliekant antivirusinį gydymą, svarbu žinoti diagnostikos sistemos jautrumą. Norint kontroliuoti virusologinį atsaką antivirusinio gydymo metu, pageidautina naudoti diagnostinę sistemą, kurios jautris yra bent 50 TV / ml. Tokius kriterijus tenkina, pavyzdžiui, HCB testo COBAS AMPLICOR analizatoriai (analitinis jautris 50 TV / ml arba 100 kopijų / ml), RealBest HCV RNR (analitinis jautris 15 TV / ml arba 38 kopijos / ml) ir kt.

Kaina pcr

PGR analizė, kurios kaina priklauso nuo naudojamų reagentų ir gali būti nuo 300 rublių. iki 5000 rublių trunka nuo vienos dienos iki savaitės.

Be PCR metodo, transkripcijos amplifikacija (TMA) taip pat naudojama norint nustatyti HCV RNR, kuris turi geresnį jautrumą (apie 5-10 TV / ml.), Tačiau šis metodas Rusijoje dar nėra įprastas.

Kaip dažnai reikia atlikti PCR hepatito C? Paprastai jis atliekamas iškart po hepatito C antikūnų nustatymo ir po ketvirtos, dvylikos, dvylikos, dvylikos, antivirusinio gydymo savaitės, taip pat po 24 savaičių po HTP pabaigos, o vėliau - kasmet SVR atveju.

Pav. 1. Geros kokybės hepatito CPP rezultatų pavyzdys.

PGR (viruso apkrova) kiekybinė analizė yra viruso (viremijos) koncentracijos kraujyje tyrimas. Virusinė apkrova yra genetinės medžiagos (virusinės RNR) vienetų, kurie yra tam tikrame kraujyje (paprastai 1 ml, kuris atitinka 1 kubinį centimetrą), skaičius. Ši suma išreiškiama skaičiais, IU / ml matavimo vienetais (tarptautiniais vienetais mililitre). Viruso dydis gali būti rodomas įvairiais būdais. Pavyzdžiui, 1,5 milijono TV / ml, kuris atitinka 1 500 000 TV / ml arba 1,5 * 10 6 TV / ml. Kai kurios laboratorijos naudoja kitus matavimo vienetus - kopijas / ml. Konversijų rodiklis iš kopijų į tarptautinius vienetus skiriasi skirtingoms bandymų sistemoms. Apytikslės vertės gali būti perskaičiuotos naudojant formulę 1 TV / ml = 4 kopijos / ml, pavyzdžiui, 5,5 * 10 5 TV / ml = 2,2 * 10 6 kopijų / ml.

Svarbu žinoti, kad nėra tiesioginio ryšio tarp viruso koncentracijos kraujyje ir hepatito C sunkumo.

Ką veikia viruso apkrova?

Pirma, užkrečiamumą. Kuo didesnė viruso koncentracija, tuo didesnė viruso persiuntimo rizika, pavyzdžiui, lytinio kontakto metu arba vertikaliai. Antra, viruso koncentracija įtakoja gydymo veiksmingumą (jei gydymas bus atliekamas remiantis interferonu). Taigi, mažas viruso kiekis yra palankus veiksnys gydymo metu, o labai didelis - nepalankus. Be to, kiekybinė PGR yra labai svarbi atliekant interferono terapiją, siekiant įvertinti jos sėkmę ir planuoti kurso trukmę. Taigi, reaguodamas į gydymą ir mažą viremiją prieš gydymą, gydymo laikas gali būti sumažintas. Ir atvirkščiai, lėtas viruso koncentracijos sumažėjimas, HTP gali būti ilgesnis.

Kokia apkrova laikoma maža ir kokia yra didelė?

Manoma, kad apkrova didesnė kaip 800 * 10 3 arba 800 000 ME / ml, kuri yra maždaug 300 x 10 4 arba 3 000 000 kopijų / ml. Krovinys virš 1 * 10 7 ME / ml laikomas labai aukštu. Tačiau iki šiol nėra specialistų sutikimo dėl didelės ir mažos viremijos skiriamų vertybių. Taigi kai kuriuose darbuose šis skaičius yra 400 000 ME / ml.

Kaip dažnai reikia kiekybinio testo?

Tai paprastai daroma prieš gydymą ir po 12 gydymo savaitės, siekiant įvertinti jo veiksmingumą, jei RNR vis dar nustatoma atliekant kokybinį tyrimą.

Kiekybinio testo rezultatas gali būti kiekybinis viremijos įvertinimas aukščiau aprašytu formatu, taip pat rezultatais "žemiau matavimo diapazono" ir "neaptiktų".

Kiekybinės PGR jautrumo riba paprastai yra aukštesnė nei kokybinė. Taigi, COBAS AMPLICOR sistema yra 600 ME / ml. "Nenustatytas" rezultatas gali reikšti, kad kiekybinis tyrimas ir patvirtinantis kokybinis tyrimas nenustatė virusinės RNR. Rezultatas "žemiau matavimo diapazono" reiškia, kad kiekybinis tyrimas neatskleidė Hepatito C RNR, tačiau virusas yra labai mažoje koncentracijoje (tuo atveju, jei atliktas papildomas patvirtinamasis kokybinis tyrimas).

Klinikinė hepatito C PCR analizė

Hepatitas yra rimta liga, turinti daug priežasčių. Jo vystymosi pagrindas yra tiesioginis ar netiesioginis kepenų pažeidimas. Atsižvelgiant į jos svarbą visam organizmui, galima tik atspėti, kaip sudėtinga yra patologija. Šiame straipsnyje mes išsamiai išnagrinėsime hepatito C kurso ypatybes ir laboratorinę diagnostiką.

Ligos priežastis yra virusinis agentas, kuris nurodo RNR turinčius patogenus. Ji turi skiriamąjį požymį - sugebėjimą keisti, ty keisti savo struktūrą. Dėl to infekcija išsiskiria dėl imuninės sistemos užpuolimo ir dažniausiai sukelia lėtinį kepenų uždegimą.

Atsižvelgiant į skirtingus viruso potipius, narkotikų atranka turėtų būti grindžiama genotipavimo rezultatais. Nepaisant ilgo ligos ir HCV struktūros tyrimo, iki šiol neįmanoma sukurti konkrečios ligos vakcinos.

Ankstyvo diagnozavimo sunkumai priklauso nuo asimptominio hepatito eigos, dėl kurio asmuo susipažįsta su gydytoju cirozės stadijoje. Norint laiku nustatyti ligą, būtina reguliariai atlikti medicininius patikrinimus. Tik atliekant kraujo laboratorinius tyrimus galima nustatyti HCV ir užkirsti kelią kitų žmonių užterštumui. Faktas yra tai, kad infekcijos vežėjas ilgą laiką negali atspėti apie patologiją ir toliau perduoti virusą sveikiems žmonėms.

Perdavimo būdai

Daugeliu atvejų virusas plinta per kraują, nes jame yra didžiausia patogeninių medžiagų koncentracija. Taigi infekcija yra perduodama:

  • su hemodialize;
  • su infekuota adata;
  • kovos procese, kai oda yra sužeista, ir sąlytis su krauju;
  • su kraujo perpylimu (kraujo perpylimas).

Infekcijos tikimybė artimumo metu yra nereikšminga, nes sperma ir makšties išskyros turi nedidelį patogenų kiekį. Infekcijos rizika gerokai padidėja pažeidžiant genitalijų gleivinės membraną. Tai pastebima agresyviu ir analiniu seksu.

Kalbant apie vertikalų perdavimo būdą, tai atliekama darbo proceso metu. Už vaisiaus nėštumo laikotarpį patogenas negali prasiskverbti į placentą į embrioną. Natūralaus gimdymo metu ligos progresuojantis vaistas perduodamas vaikui, kai oda yra sužeista, kai pastebima sąlytis su motinos krauju.

Po patogenelio įsiskverbimo į sveiką organizmą prasideda antikūnų sintezė, kuri yra apsauga nuo infekcijos ir priklauso imuninėms struktūroms. Jie randami pirminio ELISA tyrimo metu.

Siekiant patvirtinti paciento diagnozę, atliekama polimerazės grandininė reakcija. Tai patogeninio agento genetinės medžiagos ir virusinės medžiagos nustatymo analizė.

Laboratorinė hepatito C diagnozė

Laboratorinė diagnozė prasideda fermento imunologiniu tyrimu. Jo pagrindinė užduotis yra aptikti antikūnus, pagamintus prieš patogeną. Jos efektyvumas yra beveik 95%. Dėl šio tyrimo priešklinikiniame etape galima nustatyti viruso nešiotoją ir išsiųsti jį tolesniam tyrimui.

ELISA tyrimo kokybinė analizė rodo, kad paciento kraujyje yra ar nėra imunoglobulinų. Jo rezultatas gali būti "teigiamas" arba "neigiamas". Gavęs pirmąjį atsakymą, asmuo siunčiamas į kitą egzaminą - PGR. Jo kaina priklauso nuo reagentų ir laboratorijos kokybės. Polimerazės grandininės reakcijos kaina gali siekti 4 tūkstančius rublių.

PGR funkcijos

Naudojant polimerazės grandininę reakciją, netgi nedidelis biologinės medžiagos kiekis leidžia įvertinti viruso apkrovą kraujyje, ty apskaičiuoti patogenų koncentraciją viename mililitre skysčių.

Po PCR atsiradimo hepatito diagnozė tapo daug lengvesnė. Analizė leidžia nustatyti HCV RNR, nustatyti infekcinio proceso stadiją ir viruso nešiotojo užkrėtimą.

Yra keletas genetinės diagnozės tipų:

  1. Kokybinė hepatito C PCR analizė - patvirtina HCV buvimą ar jo nebuvimą kraujo subjekte:
  2. kiekybinis, per kurį galite apskaičiuoti virusų koncentraciją ir nustatyti ligos stadiją. Rezultatas pateikiamas TV / ml arba kopijų / ml (priklausomai nuo laboratorijos);
  3. genotipas - būtina nustatyti HCV genotipą. Tai reikalinga tiksliam vaistų pasirinkimui, kuris šiuo atveju bus veiksmingiausias. Analizė netiesiogiai parodo patologinio proceso sunkumą kepenyse. Taigi, trečiuoju patogenezės genotipu dažniausiai pastebima steatozė, kurios pagrindu yra riebalų kaupimasis hepatocitų (jo ląstelėse). Be to, viruso tipas paveikia terapinio kurso baigtį ir trukmę.

Klinikinė hepatito C PCR analizė

Visų pirma laboratorijoje tiriama biologinė medžiaga dėl HCV RNR. Svarbu prisiminti, kad kokybinė hepatito C analizė turi tam tikrą jautrumo lygį ir todėl ne visada gali tinkamai atsakyti. Šiuo atveju rekomenduojama pakartotinai atlikti laboratorinę diagnostiką naudojant kitus reagentus.

Norint gauti patikimus rezultatus, reikėtų naudoti bandymo sistemas, kurių jautris yra ne mažesnis kaip 50 TV / ml.

Diagnostinis rezultatas gali būti "teigiamas" arba "neigiamas". Jei patogeneko nėra kraujyje, tyrimas baigtas. Jei mėginyje aptinkamas patogeninis agentas, tada kiekybiškai įvertinama viruso apkrova.

Klaidingas ir neigiamas atsakymas gaunamas, kai yra pažeistas technologinis procesas, pavyzdžiui, aktyvūs komponentai, kurie slopina patogeno genomo kopijų kūrimą, įvedami į terpę. Taigi neįmanoma parodyti tikrą kraujo vaizdą, todėl žmogaus infekcija nėra diagnozuota.

Klaidingą teigiamą rezultatą galima gauti, jei buvo užterštas biologinės medžiagos surinkimo vamzdis, taip pat tyrimo aplinka. Be to, toks analizės atsakas yra įmanomas su mišriomis infekcijomis, kai kepenis veikia keli virusai, pavyzdžiui, hepatitas C ir D.

Kokybinio tyrimo indikacijos

Gydytojas gali skirti pacientui kokybinį hepatito C viruso RNR nustatymo tyrimą:

  • gavus teigiamą ar abejotiną fermento imunologinį atsaką;
  • diagnozės patikrinimui;
  • nustatyti viruso apkrovą;
  • nustatant ligos stadiją;
  • mišrios infekcijos diagnozė. Hepatitas C dažnai infekuoja kepenis vienu metu su "D" virusu;
  • terapinės taktikos nustatymas atsižvelgiant į sukėlėjo genotipą;
  • vertinant pokyčių dinamiką gydymo antivirusiniais vaistiniais preparatais metu.

Polimerazės grandininės reakcijos privalumai yra šie:

  1. didelis metodikos jautrumas, kuris leidžia nustatyti infekcijos faktą ikiklinikinėje stadijoje;
  2. patogeno genetinės medžiagos identifikavimas, o ne jo antikūnai;
  3. galimybė nustatyti patogeno agento potipį;
  4. didelis diagnostikos greitis, nes nereikalaujama, kad medžiaga būtų sėjama į maistinę terpę, ir pakanka specialių bandymų sistemų. Asmuo gauna rezultatą po 5 valandų;
  5. universalumas. Analizė leidžia nustatyti bet kokią genetinę medžiagą (RNR, DNR). Dėl to gydytojas gali patvirtinti hepatitu C ir kitomis ligos rūšimis (B);
  6. gebėjimas aptikti latentinę infekciją.

Kiekybiniai tyrimai

Atliekant kraujo tyrimą, naudojant polimerazės grandininę reakciją, galima apskaičiuoti patogenų skaičių fiksuotoje biologinės medžiagos talpoje. Rodiklis pateikiamas TV / ml. Analizuojant galima nustatyti paciento užkrato laipsnį, nustatyti infekcinio proceso stadiją, taip pat įvertinti vaistų terapijos veiksmingumą.

Remiantis PGR, specialistas nusprendžia, kokios dozės gali užkirsti kelią patogenų reprodukcijai. Be to, nustatoma antivirusinio gydymo trukmė ir gyvenimo prognozė. Svarbu nepamiršti, kad bandymų sistemos yra labai jautrios, todėl šis metodas leidžia patvirtinti, kad asmuo yra užsikrėtęs ikiklinikinėje stadijoje.

Genotipas

Atsižvelgiant į patogenų sugebėjimą mutaciją, jo genotipas yra būtinas norint nustatyti gydymo taktiką ir priešvirusinių vaistų pasirinkimą. Pavyzdžiui, hepatito B HCV 1 gydymas trunka 48 savaites, o teigiama tendencija pastebima tik 60% atvejų. 2 ir 3 genotipai yra palankesnės prognozės. Antivirusiniai vaistai skirti 8 mėnesius, jų veiksmingumas siekia 85%.

Remiantis statistika, daugeliu atvejų HCV 1, 2 ir 3 registruojamos Rusijos Federacijoje.

Kai iššifruoja laboratorinį tyrimą, galima atsakyti į šį atsakymą - "nerašytas". Tai reiškia, kad virusas yra cirkuliuojantis paciento kraujotakos sistemoje ir negali būti atpažįstamas bandymo sistemos. Analizės rezultatas šiuo atveju rodo, kad patogenai nėra būdingi tam tikrai geografinei vietovei.

Kaip gauti patikimus rezultatus?

Kad būtų galima atlikti kokybinį PGR tyrimą, norint nustatyti hepatito C sukėlėjo RNR, reikia atsižvelgti į paruošimo laboratorinei diagnostikai reikalavimus:

  1. kraujo mėginiai imami tuščiu skrandžiu, o "alkanas" skirtumas neturi būti trumpesnis nei 8 valandos;
  2. dvi dienas prieš tyrimą rekomenduojama nustoti gerti alkoholinius gėrimus ir atsisakyti aštrų, riebių ir rūkytų patiekalų;
  3. panaikinti kraujo krešėjimą mažinančių vaistų, pvz., heparino, įvedimą. Jei šie vaistai skirti dėl sveikatos priežasčių, turite pranešti gydytojui. Be to, specialistas turėtų žinoti apie kitų vaistų, galinčių turėti įtakos laboratorinių tyrimų rezultatams, priėmimą;
  4. Biologinės medžiagos kolekcijos išvakarėse fizioterapijos procedūros neturėtų būti atliekamos, jų neturėtų būti sunkus fizinis krūvis.

Analizės rezultatus gali įtakoti ne tik kraujo donorystė, bet ir kiti veiksniai, būtent:

  • prastos kokybės kraujo mėginiai;
  • biologinės medžiagos gabenimo rekomendacijų nesilaikymas;
  • nepakankamas laboratorijų darbuotojų mokymas;
  • tyrimo technikos nesilaikymas;
  • antikoaguliantų (heparino) įvedimas kraujo mėginių išvežimo išvakarėse. Ši vaistų grupė mažina krešėjimą, tuo pačiu lėtinant reagentų darbą.

Skirtingose ​​laboratorijose diagnostikos atsakas gali šiek tiek skirtis, tačiau šios klaidos neturi įtakos galutiniam tyrimo rezultatui.

Ypatingas dėmesys skiriamas bandymų sistemoms, kurios naudojamos laboratorijoje. Dažnai pirmenybė teikiama jautriems reagentams. Tai svarbu pacientams, turintiems mažą virusų kiekį, nes jų sunku nustatyti.

Kaip dažnai atliekamas laboratorinis tyrimas?

Pirminė polimerazės grandininė reakcija atliekama žmonėms, kurie buvo aptikti imunologiniais tyrimais nustatant antikūnus prieš hepatito patogenezę. Šiuo atveju jis yra paskirtas patvirtinti, kad asmuo yra užsikrėtęs ir nustatomas ligos etapas. Be to, analizė leidžia nustatyti viruso potipį, kuris yra ypač svarbus vaistų pasirinkimui.

Kitas privalomų laboratorinių tyrimų laikotarpis yra 3 mėnesiai nuo antivirusinio gydymo pradžios. Diagnostika leidžia įvertinti vaistų veiksmingumą, koreguoti dozę ar pakeisti.

Be pagrindinių testų, PGR galima papildomai atlikti 4 ir 24 savaites nuo gydymo pradžios. Teigiamą ligos progresą patvirtina sumažėjęs viruso kiekis po trijų gydymo mėnesių. Pavyzdžiui, jis turėtų sumažėti nuo 1 milijono TV / ml iki kelių šimtų tūkstančių.

Jei patogeninių agentų koncentracija kraujyje išlieka tokio paties lygio arba šiek tiek padidėja, tai rodo, kad antivirusinių vaistų veiksmingumas yra neveiksmingas ir reikalingas jų pakeitimas. Pasibaigus gydymui naudojant PCR, galima patvirtinti paciento atsigavimą.

Norint tinkamai interpretuoti laboratorinės diagnostikos rezultatus, reikia konsultuotis su hepatologu arba infekcinės ligos specialistu. Atsižvelgiant į tai, kad ELISA tyrimai dažnai yra klaidingi, analizė naudojama tik pradinei patikrai. Kruopščiau ištyrus paciento naudojamą polimerazės grandininę reakciją.

Kaip atsigauti nuo hepatito C su 97% tikimybe?

Šiandien šiuolaikiniai naujosios kartos "Sofosbuvir" ir "Daclatasvir" vaistai greičiausiai gydys hepatitu C 97-100%. Galite įsigyti naujausius vaistus Rusijoje iš oficialaus Indijos farmacijos milžiko Zydus Heptiza atstovo. Užsakyti vaistiniai preparatai bus pristatyti per kurjerį per 4 dienas, apmokėti gavus. Gaukite nemokamą patarimą dėl šiuolaikinių vaistų vartojimo, taip pat sužinokite apie tai, kaip įsigyti galite, oficialioje "Zydus" svetainėje Rusijoje.

Kas yra hepatito C RNR?

Hepatito C viruso RNR tyrimas yra svarbiausia procedūra, leidžianti tiksliai nustatyti pacientų gydymo trukmę ir metodus. Ligos diagnozę sudaro keletas skirtingų kraujo tyrimų, tokių kaip:

  • hepatito C žymenys (anti-HCV);
  • hepatito C viruso RNR (HCV RNR) nustatymas.

Pirmasis tyrimas atliekamas po pirmojo įtarimo dėl hepatito. Antrasis variantas yra svarbiausias HCV RNR gydymas, todėl jį reikia išsamiau išnagrinėti.

Kas yra virusinis hepatitas C?

Virusinis hepatitas C arba HCV yra užkrečiama liga, kuri veikia kepenis. Infekcija su virusu vyksta per kraują. Jūs galite užsikrėsti atliekant kraujo perpylimą, kai nesilaikoma medicininių instrumentų sterilizavimo taisyklių. Retais atvejais yra atvejų, kai liga gaunama lytiniu būdu arba nuo nėščios motinos iki vaisiaus. Hepatitas C gali būti dviejų tipų.

Lėtinis hepatitas C yra labiausiai pavojingas. Tai ligos forma, kuri gali trukti visą gyvenimą. Tai sukelia rimtus kepenų funkcijos sutrikimus, pvz., Cirozę ar vėžį. 70-90% užsikrėtusių žmonių liga tampa lėtinė.

Svarbiausias hepatito C pavojus yra tai, kad jis vyksta slaptai, be piktybinių požymių. Tuo pačiu metu jie dažniausiai skundžiasi dėl karščiavimo, pykinimo ir vėmimo, fizinio silpnumo, padidėjusio nuovargio, apetito praradimo ir svorio. Tuo pačiu metu, dėl nedidelio kepenų audinio kietėjimo, gana dažnai atsiranda piktybinė degeneracija. Dėl šios priežasties hepatitas C dažnai vadinamas "laiko bomba" arba "švelnus žudikas".

Kitas ligos požymis yra jos lėtas vystymasis, apskaičiuotas per daugybę metų.

Paprastai tie, kurie užsikrėtę, nemano jokių simptomų ir nežino apie jų tikrąją būklę. Dažnai liga gali būti aptikta tik susisiekiant su gydytoju kitame objekte.

Rizika apima:

  • vaikai, kurie iš savo motinos gavo hepatito C virusą;
  • priklausomiems asmenims;
  • žmonės, kurie perverdavo kūno dalis arba tatuiruotės nesteriliomis priemonėmis;
  • donoro kraujo ar organų gavimas (iki 1992 m., kai hemodializė nebuvo atlikta);
  • ŽIV užsikrėtusiems žmonėms;
  • medicinos personalas, susilietęs su užsikrėtusiais pacientais.

Hepatito C RNR nustatymas

Hepatito C viruso RNR apibrėžimas, taip pat vadinamas hepatito C PCR, yra biologinės medžiagos (kraujo) tyrimas, kuris gali būti naudojamas norint nustatyti pačią paties hepatito viruso genomaterialo buvimą organizme (bet kuris atskiras virusas yra viena RNR dalis).

Pagrindinis tyrimo metodas yra PCR arba polimerazės grandininės reakcijos metodas.

HCV RNR yra dviejų tipų kraujo tyrimai:

Kokybės tyrimas

Kokybinės analizės atlikimas leidžia nustatyti, ar virusas yra kraujyje. Visi pacientai, kuriems buvo nustatyti C hepatito antikūnai, turi išlaikyti šį testą. Remiantis jo rezultatais, galite gauti 2 atsakymus: "šiuo metu" arba "nėra" viruso. Teigiamu testo rezultatu (nustatoma) galima spręsti apie viruso, kuris infekuoja sveikas kepenų ląsteles, aktyvią reprodukciją.

Tyrimas, atliktas naudojant aukštos kokybės PGR, nustatomas pagal konkretų jautrumą - nuo 10 iki 500 TV / ml. Jei hepatito virusas aptiktas kraujyje, kurio specifinis kiekis yra mažesnis nei 10 TV / ml, viruso aptikimas gali tapti neįmanomas. Labai mažas specifinis viruso kiekis pastebimas tarp pacientų, kuriems buvo skiriamas antivirusinis gydymas. Todėl svarbu, kad medicinos sistemos jautrumas būtų didelis, kad diagnozuotų ir nustatytų kokybinį rezultatą polimerazės grandinės reakcijoje.

Dažnai C-hepatito polimerazės grandininė reakcija atliekama iškart po atitinkamų antikūnų nustatymo. Tolesni testai, atliekami antivirusinio gydymo metu, atliekami 4, 12 ir 24 savaites. Kita analizė po HTP nutraukimo atliekama po 24 savaičių. Tada - kartą per metus.

Kiekybinis testas

Kiekybinė PGR RNR analizė, kartais vadinama viruso apkrova, nustato viruso koncentraciją (specifinį turinį) kraujyje. Kitaip tariant, virusinė apkrova apibrėžiama kaip tam tikras virusinės RNR kiekis, kuris gali būti tam tikrame kraujo kiekyje (paprastai yra 1 ml, lygus 1 cm kubo). Bandymų rezultatų vienetai yra tarptautiniai (standartiniai) vienetai, padalinti iš vieno mililitro (TV / ml). Viruso turinys kartais atrodo skirtingai, tai priklauso nuo laboratorijų, kuriose atliekami tyrimai. Dėl hepatito C kiekybinis nustatymas kartais naudoja tokias vertes kaip kopijos / ml.

Turite suprasti, kad nėra specifinės priklausomybės nuo C hepatito sunkumo nuo šio štamo koncentracijos kraujyje.

Patikrinkite "virusų pakrovimas" leidžia nustatyti ligos infekcijos laipsnį. Taigi, rizika užsikrėsti kitą asmenį virusu didėja, kai padidėja hepatito koncentracija kraujyje. Be to, didelis viruso kiekis sumažina gydymo poveikį. Todėl mažas virusų kiekis yra labai palankus veiksnys sėkmingam gydymui.

Be to, hepatito C testas ir jo nustatymas PCR turi didelę įtaką gydant ligą ir nustatant gydymo sėkmę. Remiantis tyrimų rezultatais, planuojama reabilitacijos programa. Pavyzdžiui, jei specifinė hepatito viruso koncentracija yra per lėta, antivirusinis gydymas yra ilgesnis ir atvirkščiai.

Šiuolaikinėje medicinoje manoma, kad didesnė nei 800000 ME / ml apkrova. Krovinys, viršijantis 10 000 000 ME / ml, laikoma kritine. Tačiau ekspertai iš skirtingų šalių vis dar neturi tos pačios nuomonės apie viruso apkrovos ribas.

Kiekybinio testo dažnumas

Apskritai, kiekybinė hepatito analizė atliekama prieš antivirusinį gydymą ir praėjus 3 mėnesiams po gydymo pabaigos, siekiant nustatyti gydymo kokybę.

Todėl kiekybinis bandymas bus laikomas kiekybiniu pirmiau nurodyto pavyzdžio rezultatų įvertinimu. Todėl bus paskelbtas nuosprendis "žemiau matavimo ribos" arba "neaptiktas kraujyje".

Kokybinio tyrimo jautrumo parametras paprastai yra mažesnis už kiekybinės analizės jautrumą. "Trūkstamas" sintezė rodo, kad abiejų tipų tyrimai nerado viruso RNR. Su bandymo indikatoriumi "žemiau išmatuoto diapazono", kiekybinės tipo analizė greičiausiai nerado hepatito RNR, nors tai patvirtina ir labai mažo specifinio turinio viruso buvimą.

Hepatitas C ir jo genotipai

Hepatito C viruso RNR genotipas nustato įvairių genetinių hepatito C tipų buvimą. Mokslui žinoma daugiau nei 10 rūšių viruso genomo, tačiau medicinos praktikoje pakanka atskirti keletą genotipų, kurių regione yra didžiausia dalis. Genetinio tipo nustatymas atlieka pagrindinį vaidmenį pasirenkant gydymo laiką, o tai yra labai reikalinga, jei atsižvelgsite į didelį šalutinį vaistų poveikį hepatitui.

Virusinio hepatito C gydymo metodai

Paprastai vienintelis veiksmingas būdas išgydyti hepatito virusą yra dviejų vaistų derinys: interferonas-alfa kartu su ribavirinu. Atskirai šie vaistai nėra tokie veiksmingi. Rekomenduojamas vaistų dozavimas ir vartojimo laikas turėtų būti nustatytas tik gydytojo ir atskirai kiekvienam pacientui. Gydymas šiais vaistiniais preparatais gali trukti nuo 6 iki 12 mėnesių.

Šiandien neišradę narkotikai, garantuojantys 100 procentų išlikimą iš viruso. Tačiau gydant tinkamą gydymą, pacientų gijimas gali siekti iki 90% atvejų skaičiaus.

Hepatito C žymenys ir HCV RNR kiekybinių rezultatų interpretacija

Neseniai "kiekybinės hepatito analizės su dekoduojant" paieška vis dažniau rodoma interneto išteklių paieškos sistemose.

Iš tiesų hepatito virusas yra paplitęs ir pavojingas, liga veikia kepenis. Jo pavadinimas kilęs iš lato. hepatitas yra kepenų uždegimas. Infekcija vyksta per kraują ar seksualiai, dažniausiai suaugusieji yra 25-50 metų amžiaus.

Yra keletas šios ligos tipų. Hepatitas C neturi ryškių sunkumų, tačiau 40-70% atvejų jis tampa lėtinis, gali sukelti cirozę ir vėžį. Dėl šios ligos reikia tiksliai diagnozuoti ir interpretuoti duomenis, kurių metodika buvo sukurta. Vienas iš jų yra RNR analizė HCV RNR PCR.

RNR analizė HCV RNR PCR

RNR (ribonukleino rūgštis) yra makromolekulės tipas, vienas iš gyvosios ląstelės komponentų. RNR yra atsakinga už genetinės informacijos kodavimą. Hepatito C virusas turi RNR molekulę ir linkęs mutacijai. Yra 6 jo potipiai, taip pat daugelis potipių.

Lėtinė jos lėtinė stadija sukelia kepenų fibrozę - plečiasi jungiamieji audiniai, organo struktūra palaipsniui sutrinka. Fibrozė yra tinkama laiku gydyti, nes kepenys dar nepasireiškė destruktyviais procesais. Skirtingai nei cirozė, sunki negrįžtama kepenų liga, į kurią gali išsivystyti fibrozė, laiku nesiimant reikiamų priemonių.

Asmuo, kurio įtarimas yra hepatito B viruso, nustatomas dėl jo antikūnų. Jei jų nėra, liga yra neįtraukta, jei jie yra, jie naudojasi PGR (polimerazės grandinine reakcija) metodu. Molekulinė biologija yra eksperimentinė, tačiau užima pirmaujančią vietą tarp infekcinių ligų diagnozavimo metodų. Su juo galite žymiai padidinti molekulinių fragmentų koncentraciją mėginyje. 10 dienų po infekcijos, RNR jau galima nustatyti kraujyje.

Šis metodas yra vienintelis, kuris gali nustatyti ligą savo ankstyvosiose stadijose. Kitais būdais (pvz., Atliekant biocheminius kraujo tyrimus) to negalima padaryti, nes kepenys dar nėra paveiktos.

Metodą 1993 m. Atrado biochemikas Kerry Mullis, už kurį jis laimėjo Nobelio premiją. PGR buvo medicinos ir mokslo laimėjimas, nes tai leido greitai ir tiksliai nustatyti kraujo ir kitų žmogaus biologinių medžiagų infekcijas. Kitaip tariant, šis metodas paspartino infekcinių ligų diagnostiką.

RNR HCV RNR analizė PCR yra veiksminga dėl šių priežasčių:

  • turi gerą jautrumą - aptinkamas net nedidelis viruso kiekis kraujyje;
  • nustatomas pats virusas, o ne jo sukurtas šalutinis produktas;
  • Nustatomas patogenų tipas.

Kvalifikuojamos HCV RNR kiekybinės analizės skirtumai

PGR metodas apima du pagrindinius būdus, kaip ištirti biologinę medžiagą ieškant hepatito C viruso:

Šie tyrimai turi skirtingas užduotis.

Kokybinė hepatito analizė su dekodifikavimu patvirtina, kad virusas jau yra užsikrėtęs nuo antikūnų prieš šią ligą. Jei tyrimas duos teigiamą rezultatą, tada aptikta liga. Kitaip tariant, asmuo yra užsikrėtęs. Jei gaunamas neigiamas rezultatas, tai reiškia, kad asmuo nėra užsikrėtęs arba viruso koncentracija yra per maža. Ši koncentracija tokiu būdu neaptinkama.

Be to, klinikinis ligos vaizdas yra pagrįstas hepatito C žymenimis ir analizės interpretacija. Pagrindiniai žymenys yra imunoglobulinai (antikūnai) M ir G. Jų buvimas paciento kraujyje rodo sveika organizmo nenormalų procesą. Remiantis šių antikūnų buvimu, pacientas paprastai nustato pirminę diagnozę.

Kiekybinė analizė skirta pirminio antikūnų aptikimo ir, jei reikia, gydymo.

Be to, hepatito C kiekybinė analizė nustatoma mišriai hepatitui nustatyti (kartkartėmis infekuoti keli virusai).

Kiekybinė analizė su dekodavimu atliekama siekiant:

  • galutinės diagnozės patikslinimas;
  • pastato prognozes apie ligos eigą ir jos gydymą - pratęsimą, gydymo sumažėjimą ar taktikos pasikeitimą;
  • stebėjimo terapija.

Kad rezultatai būtų teisingi, prieš atlikdami kraujo donorystę turite laikytis nustatytos tvarkos.

  • atvykti į laboratoriją tuščiu skrandžiu, paskutinį kartą galite valgyti 8 valandas prieš procedūrą;
  • dvi dienas prieš tyrimą alkoholis, riebalai ir keptas maistas yra draudžiami;
  • ultragarsu, masažu, fizioterapija prieš tyrimą negali būti atlikta;
  • vaistas draudžiamas tą dieną, jei neįmanoma atšaukti tam tikrų vaistų suvartojimo, apie tai pranešama prieš imant kraują;
  • prieš procedūrą rekomenduojama kuo labiau sumažinti fizines ir nervų apkrovas.

Šių reikalavimų vykdymas bus pagrindas gauti teisingus hepatito C kiekybinės analizės rezultatus.

Kiekybinės analizės interpretavimas

Gavę kiekybinės analizės rodiklius, būtina iššifruoti hepatito C testų rezultatus. Rezultatai apskaičiuojami tiek vienetais TV / ml, tiek kopijų viename mililitre. Norėdami gauti rezultatus, konvertuoti į kopijas, naudokite kelis metodus.

  • HCV monitorius (perskaičiavimo koeficientas į ME - 2,7);
  • LCX HCV RNR (perskaičiavimo koeficientas į ME - 3,8).

Lentelė HCV RNR kiekybinės analizės interpretavimas PCR.

Hepatito C viruso diagnozė

Hepatito C virusas (HCV) yra RVN turintis virusas iš Flaviviridae šeimos. Ši infekcija gali daugintis kraujo ląstelėse (monocitų, neutrofilų, B limfocitų ir makrofagų), taip pat veikia pačios kepenų ląsteles - hepatocitus. Dėl aukšto mutacijų aktyvumo šio tipo hepatitas gali išvengti poveikio žmogaus imuninei sistemai.

Yra 11 genetų ir tokio viruso potipių masė, kuri skiriasi laipsniu kepenų pažeidimo ir veikia hepatito gydymo trukmę. Toks įvairovė hepatito C reikalauja įvairių antivirusinių terapijų. Pavyzdžiui, 1 ir 4 hepatito genotipai turi būti gydomi 48 savaites, o gydymo kursas nuo 2 ir 3 tipo virusų - gali trukti tik 24 savaites.

Po to, kai greitas hepatito C tyrimas parodė teigiamą rezultatą, atliekama PGR analizė, siekiant aptikti viruso RNR kraujo mėginiuose.

PGR diagnostika

Polimerazės grandininė reakcija (PCR) yra eksperimentinė virusų aptikimo technologija. Toks hepatito C tyrimas gali žymiai padidinti tam tikrų DNR fragmentų ar viruso RNR koncentraciją paimtuose mėginiuose. Tai leidžia juos atpažinti ir net skaičiuoti.

Šis hepatito C testas atliekamas pagal šią procedūrą:

  1. Į mėgintuvėlį įterpiamas kraujo mėginys (genetinė medžiaga), kuriame gali būti norimo hepatito geno. Jame yra specialios medžiagos, gruntai, jie yra trumpo ilgio segmentai iš norimo geno, kurie yra chemiškai sintetinti. Šiam indui taip pat pridedama DNR arba RNR polimerazė, ji gali sukurti nukleino rūgšties grandines, kurios visiškai identiškos originalui. Gautoms kompozicijoms pridedama laisvų nukleotidų, kurie yra specialios DNR ir RNR statybinės medžiagos, rinkinys, o viename iš jų yra nedidelių radioaktyviojo fosforo dalelių.
  2. Gautas mišinys iš pradžių šildomas iki 95 laipsnių, dėl kurio atskiedžiamos abi DNR spiralės, susipynusios įprastoje būsenoje.
  3. Norint tęsti analizę, vaistas yra aušinamas, o tuo pačiu metu gruntai pridedami prie norimo hepatito viruso genomo sekcijos, užkertant kelią DNR formavimui į dvigubą spiralę. Kai mišinys atšaldomas, polimerazė ieško viengubų nukleotidų grandžių. Šio fermento pritvirtinimo metu jis nuslysta išilgai DNR grandinės (kaip virvės virve esantis blokas), o ant dvigubos spiralės jis negali "dirbti", todėl mišinys šildomas.
  4. Norėdami pailginti analizę, atliekamas pakartojimas, o tai vėl sukelia nukleotidų grandinių atskyrimą. Kai tokie PGR ciklai atliekami mėginyje, norimų hepatito genų skaičius padidėja geometrine proporcija, o likusios genetinės medžiagos gaminamos (formuojamos) tik linijiniu būdu.
  5. Norint užbaigti tyrimą, tirpalas išvalomas iš likusių nukleotidų dalelių. Jie yra atskirti elektroforezės būdu, atskyrę pagal DNR grandinės molekulinės masės parametrus. Tokie hepatito C tyrimai naudojant PCR leidžia nustatyti, ar mėginiai yra norimi virusiniai genai, ar ne.

Šio bandymo privalumas yra labai aukštas PGR reakcijos slenkstis. Tokia diagnozės technika, idealiu atveju, reikalinga tik vienam viruso genomui visam imties atvejui.

Be to, ši PGR yra visiškai specifinė. Kiekviename genelyje yra unikali nukleotidų seka, kuri, kaip ir pirštų atspaudai, niekur negali būti kartojama. Šiai hepatito C analizei sintezuojami pradmenys, kad jie visiškai atitiktų unikalius ieškomų genų regionus, kurių jokia kita seka nėra.

Ši technika taip pat leidžia jums analizuoti hepatito C ir juos nustatyti, padedant nustatyti galutinę diagnozę.

Toks laboratorinis tyrimas suteikia daugiau informacijos negu tik apie hepatito C viruso ar kito tipo RNR buvimą ar nebuvimą kraujo mėginiuose. Nustatant radioaktyviosios spinduliuotės parametrą, galima nustatyti, kiek pageidaujamos genetinės medžiagos buvo iš pradžių tiriamame mėginyje. Tai leidžia jums nustatyti vadinamojo viruso apkrovos parametrą - tam tikro tūrio hepatito RNR dalelių koncentraciją.

PGR kokybinė analizė

Ši analizė leidžia nustatyti hepatito B viruso buvimą kraujo mėginiuose. Tai turėtų būti atliekama visiems žmonėms, kuriems nustatyta hepatito antikūnų.

Tokių tyrimų rezultatas gali būti tik dvi vertybės:

  • "Aptikta". Toks teigiamas testo rezultatas interpretuojamas taip: analizuojamame imtyje buvo rasta hepatito viruso RNR fragmentų iš biologinių medžiagų. Iš to išplaukia, kad pacientas buvo užsikrėtęs šiuo virusu. Tai gali reikšti, kad patogeninis hepatitas dauginasi organizme ir infekuoja naujas ląsteles, sunaikina kepenis.
  • "Nenustatyta". Šis rezultatas sako, kad bandinyje, kuris buvo analizuojamas šioje laboratorijoje, nebuvo aptikta jokių RNR fragmentų, kurie yra būdingi hepatito C virusui. Taip pat yra galimybė, kad patogeno viruso RNR koncentracija bandomajame mėginyje yra tokia maža, kad tyrimas jo negalėjo aptikti.. Tokiais atvejais sakoma, kad koncentracijos lygis yra mažesnis už bandymo jautrumo ribą.

Toks tyrimas taip pat gali būti klaidingai teigiamas arba klaidingai neigiamas dėl biologinės medžiagos užteršimo ar tam tikrų cheminių medžiagų, kurios reikalingos analizei, reaguoti į mėginius.

Reikėtų pabrėžti, kad hepatito C ūmių fazių metu kokybinis tyrimas naudojant PCR metodą gali aptikti jo RNR po 1-2 savaičių nuo organizmo užkrėtimo momento. Tai reiškia, kad ligą galima nustatyti ilgai, kol atsiranda išorinių simptomų ar antikūnų prieš hepatritą organizme atsiradimas.

Kraujo mėginių ėmimas (iš venų) geriausia tuščiam skrandžiui.

PCR kiekybinė analizė

Naudodamiesi šia analize, nustatykite hepatito viruso koncentracijos lygį paciente (viruso apkrova). Tokio bandymo turi būti atliktas, norint įvertinti viruso RNR kiekį tam tikro tūrio vienetui.

Šio metodo atliktais hepatito C iššifravimo tyrimais gali būti tokie rezultatai:

  • Kiekybinis rodiklis (skaičiais)

Viruso koncentracija (suma) pateikta skaičiais. Tam naudojami skirtingi matavimo vienetai: arba IU / ml (tarptautinis vienetas mililitre), arba kopijos / ml (viruso RNR viename mililitre kopijų skaičiaus). Vidutiniškai 1 TV / ml atitinka 4 kopijas / ml, nes skirtingoms bandymų sistemoms tokie vienetai turi skirtingus perskaičiavimo koeficientus.

Manoma, kad žemos virusinės apkrovos vertės yra mažesnės kaip 400 000 TV / ml, o didelė yra 8 000 000 TV / ml.

Toks kiekybinis vertinimas leidžia nustatyti ligos infekcijos lygį ("infekcinį") lygį. Kuo daugiau šio analizės rodiklio, tuo didesnė tikimybė, kad patogenukas gali būti perduotas kitiems žmonėms (seksualiniu ryšiu arba vertikaliai).

Šis nuosprendis reiškia, kad kiekybinis metodas negali aptikti hepatito RNR, tačiau pats virusas yra organizme, tik labai mažose koncentracijose. Tai patvirtinta papildoma kokybine PGR analizė, o jo teigiamas rezultatas liudija apie hepatito buvimą.

  • Rezultatas nenustatytas

    Šis teigiamas analizės aiškinimas leidžia manyti, kad pats kiekybinis testas kraujo mėginyje negali aptikti specifinių hepatito C viruso RN dalelių.

  • Kiekybinė PGR analizė, atlikta įvairiais antivirusinio gydymo laikotarpiais (1, 4, 12 ir 24 savaites), leidžia mums įvertinti gydymo veiksmingumą ir padaryti reikiamus pakeitimus.

    Analizės ypatumai

    Šis testas turi būti atliktas siekiant nustatyti skirtingus hepatito C genotipus. Šiuo metu yra 11 genotipo šio patogeno ir daugelio potipių. Mūsų šalyje yra 1, 2 ir 3 rūšių hepatito C genotipai. Laboratorijose jie gali identifikuoti įvairius šių rūšių potipius: 1a, 1b, 2a, 2b arba 3, 4, 5, 6 genotipai su įvairiais potipių modifikacijomis. Visų šių hepatitų atveju nustatymo specifiškumas yra 100%.

    Nustatant genotipo pakeitimą, galima pasirinkti tinkamą gydymą. Tam tikro tipo genotipo buvimas pacientui neleidžia manyti, kad liga yra lengviau ar sudėtingesnė, tai yra tik hepatito viruso rūšys, o ne daugiau.

    Tais atvejais, kai viruso genotipas negali būti izoliuotas laboratorijoje, rezultatas gali būti pateiktas: "Nenurodyta. Buvo tiriami genotipai: tokie ir tokie "(pavyzdžiui, 1a, 2c, 3av). Šis dekodavimas rodo, kad šioje laboratorijoje nebuvo tinkamų reagentų, kurie galėtų nustatyti hepatito viruso genotipą. Tyrime buvo ištirti virusai, sąrašo duomenys, tačiau jų atitiktis RNR mėginiams nebuvo nustatyta.

    Norėdami atlikti galutinę diagnozę, nepakanka tik vieno tipo analizės. Kiekvienas bandymas gali sukelti klaidingą teigiamą rezultatą. Norint tiksliai nustatyti hepatito tipą ir šio kūno uždegimo žalą, atlikite išsamų tyrimą. Tai atlikta kepenų biopsija ir išbandomi jos fermentai: ALT, ASAT, taip pat šarminės fosfatazės ir LDH. Taip pat galima atlikti bilirubino testą ir protrombino indekso analizę.

    Tik tokių testų ir laboratorinių tyrimų, kurių bendra paciento būklės analizė, rinkinys padės nustatyti hepatito buvimą organizme, jo formą ir sunkumą. Remiantis jų pagrindu, gydytojas gali nustatyti tolesnį gydymą ir pateikti galimą paciento prognozę.

    PGR tyrimas hepatitui C: tipai, indikacijos, stenograma

    Virusinis hepatitas C yra rimta liga, atsirandanti dėl kepenų pažeidimo. Aštuoniasdešimt procentų pacientų jis tampa lėtinis. Virus dauginasi kepenų ląstelėse - hepatocitų - ir sukelia jų mirtį. Negyvas audinys yra pakeičiamas jungiamojo audinio kampeliais, išsivysto fibrozė.

    Kuriant fibrozę, kepenys negali atlikti savo funkcijų, prasideda kepenų cirozė, kuri dėl savo komplikacijų yra pavojinga: padidėjęs slėgis vartų venoje, kraujavimas iš virškinimo trakto, kraujo krešėjimo sutrikimas, psichiniai pokyčiai dėl galvos smegenų branduolių.

    Ligos priežastis yra infekcija, kurią sukelia Flaviviridae šeimos virusas, priklausantis RNR viruso rūšiai. Tai reiškia, kad genetinė medžiaga, kuria sintezuojami patogeno baltymai, yra užkoduota ribonukleino rūgšties molekulėje. Infekcija pasireiškia per kraują, lytiniu būdu ir nuo nėščios moters iki vaisiaus. Deja, tarp infekcijos ir antikūnų gamybos pradžios gali praeiti pakankamai daug laiko - nuo dviejų savaičių iki šešių mėnesių. Tai neleidžia nustatyti infekcijos imunologiniu tyrimu ir pradėti gydymą ankstyvosiose stadijose.

    Kas yra PGR analizė?

    PGR yra molekulinės analizės metodas, leidžiantis nustatyti patogeno genetinę medžiagą jau pirmąją savaitę po infekcijos, naudojant polimerazės grandininę reakciją. Tyrimas turi aukštą specifiškumą, tikslumą ir leidžia ne tik nustatyti viruso buvimą ar jo nebuvimą, bet ir jo koncentraciją bei genotipą.

    Tyrimui imamas paciento kraujas, kuriame potencialiai gali būti viruso RNR. Į kraują dedama pradmenų - dirbtinai sintezuoti norimo mažo ilgio geno regionai, o RNR polimerazė yra specifinis fermentas, kuris pakartotinai padidina patogenų genetinės medžiagos kiekį. Naudojant specialų įrenginį, atliekami keli šildymo ir vėsinimo ciklai. Tada medžiaga analizuojama ir lyginama su žinomais viruso genais, dėl kurių daroma išvada apie infekcijos buvimą ar nebuvimą.

    Hepatito C PCR analizės tipai

    Yra trys PGR analizės tipai:

    1. PGR kokybinė analizė. Pirmasis tyrimo etapas. Tai leidžia jums nustatyti genetinę viruso medžiagą kraujyje.

  • Kiekybinė PGR analizė. Leidžia nustatyti viruso kiekį - patogenelio genetinės medžiagos koncentraciją viename mililitre kraujo. Šis tyrimas atliekamas prieš gydymo pradžią, tada pirmoje, ketvirtoje, dvyliktoje ir (jei kursas yra ilgas) dvidešimt ketvirtą gydymo savaitę, kad būtų įvertintas jo veiksmingumas.

  • Genotipas Hepatito C sukėlėjas dažnai ir greitai mutavo. Šiame plane buvo rasti septyni šio viruso genotipo variantai. Rusijoje pirmasis, antrasis ir trečias tipai yra įprasti. Kiekvienas genotipas turi skirtingą atsparumą gydymui, pavyzdžiui, pirmojo tipo gydymo veiksmingumas yra šešiasdešimt procentų, o antruoju ir trečiuoju - šis skaičius siekia aštuoniasdešimt penkis. Todėl, norint pasirinkti tinkamus vaistus ir nustatyti gydymo trukmę pakankamai ilgai, būtina tiksliai nustatyti, kokio tipo virusas pacientas yra užsikrėtęs.
  • Indikacijos hepatito C PCR analizei

    PGR tyrimas nustatomas šiais atvejais:

    • kontaktas su ligoniu, su kuriuo gali pasireikšti infekcija;
    • teigiamas fermentinis imuninis tyrimas;
    • cirozės požymiai: kepenų dydžio pokyčiai, blužnies išsiplėtimas, poodinio veninio audinio išvaizda pilve;
    • kepenų pažeidimo simptomų atsiradimas: skausmas dešinėje pilvo srityje, odos pageltimas;
    • padidėjęs ALT ir AST aktyvumas kraujo biocheminiuose tyrimuose;
    • prieš pradedant gydymą nustatyti viruso kiekį;
    • stebėti antivirusinio gydymo veiksmingumą;
    • po gydymo kontroliuoti atsinaujinimą;
    • esant diagnozuotam hepatitui B, pašalinti keletą kepenų pažeidimų.

    Paaiškinimas apie hepatito C PCR tyrimus

    Gripo hepatito C dekodavimo PGR analizė ir fermentinis imuninis tyrimas turi būti atliekamas hepatologo ar infekcinių ligų specialisto. PGR analizė yra būtina kartu su kraujo, biopsijos ir ultragarsu biocheminių tyrimų duomenimis. Tik kvalifikuotas gydytojas galės analizuoti tyrimų rezultatus ir, remdamasis jais, nustatyti tinkamą gydymą.

    Kokybinės analizės dekodavimas.

    Analizuotoje biologinėje medžiagoje rasti patogenų genetinė medžiaga. Infekcija patvirtinta.

    Infekcijos nėra arba patogenų RNR kiekis yra mažesnis už jautrumo ribą.

    Dekodavimo kiekybinė analizė.

    Normalus greitis sveikiems žmonėms. Tai reiškia, kad tiriamoje medžiagoje nėra hepatito C RNR arba jo koncentracija yra mažesnė už tyrimo jautrumo ribą.

    RNR koncentracija yra mažesnė už kiekybinio įvertinimo diapazoną. Šie rezultatai yra labai atidžiai interpretuojami, susiejami su kitų studijų duomenimis, dažnai pakartotinai mokomi.

    Viruso apkrova tam tikroje koncentracijoje yra maža. Paprastai viruso kiekio sumažėjimas reiškia, kad gydymas yra sėkmingas.

    Daugiau nei 8 * 10 ^ 5 TV / ml

    Viruso lygis tam tikroje koncentracijoje yra didelis.

    Daugiau nei 2,4 * 10 ^ 7 TV / ml

    RNR kiekis viršija kiekybinio nustatymo intervalo viršutinę ribą. Dėl šio rezultato neįmanoma padaryti išvadų apie viruso apkrovos laipsnį. Paprastai tokiais atvejais bandymas kartojamas su kraujo mėginio skiedimu.

    Dekodavimo genotipas.

    Aptikta tam tikro genotipo RNR

    Biomateriale nustatytas tam tikro genotipo ir potipio hepatito C virusas. Rezultatas užkoduotas romėniškuosius skaitmenimis ir lotyniškomis raidėmis, pvz., 1a, 2b. Iš viso yra septyni genotipai ir šešiasdešimt septyniai potipiai, tačiau Rusijoje yra tik trys pirmieji tipai.

    Aptikta hepatito C viruso RNR

    RNR buvo rasta retos genotipo kraujyje Rusijoje, kurio negalima priskirti prie pirmojo, antrojo ar trečiojo tipo. Reikia daugiau mokslinių tyrimų.

    Šis rezultatas rodo, kad pacientas yra sveikas arba kad patogeno RNR kiekis yra per mažas.

    Gali būti, kad hepatito C PCR analizė yra neigiama, o su fermentais susieta imunosorbento analizė atpažįsta antikūnus prieš virusą. Tai reiškia, kad pacientui pasireiškė ūmus hepatitas C ir atsigavo pats. Maždaug dvidešimt infekcijos atvejų atsiranda spontaniškai, jei paciento organizmas yra pakankamai atsparus infekcijai.

    Nors PCR yra labai tiksli analizė, jos rezultatai gali būti iškraipyti šiose situacijose:

    • kraujas buvo perkeltas į laboratoriją netinkamomis sąlygomis, temperatūra buvo pažeista;
    • biomaterialas bandinys buvo užterštas;
    • heparino ir kitų antikoaguliantų kraujyje likučiai buvo likę;
    • Nustatyta, kad tyrėjai yra inhibitoriai - medžiagos, kurios sulėtins arba sustabdo polimerazės grandininę reakciją.

    PGR privalumai naudojant kitus metodus

    1. Diagnozė ankstyvosiose stadijose. PCR aptinka genetinę sukėlėjo medžiagą. Naudojant imunofluorescencijos analizę, galima nustatyti tik imunoglobulinus - medžiagas, kurias organizmas gamina reaguodamas į infekciją. Jei užsikrėtė hepatitu C, intervalas tarp infekcijos ir imuninio atsako pradžios gali būti keletas savaičių ir mėnesių, tuo metu ELISA tyrimas bus neveiksmingas. PCR atsakys per pirmąją savaitę po infekcijos.

  • Maža klaidų tikimybė. Tiriamoje medžiagoje nustatomas genetinės medžiagos plotas, būdingas tik vienam patogenų tipui. Tai pašalina klaidingus rezultatus. Kai ELISA klaidos yra įmanomos, kadangi tos pačios rūšies antikūnai gali būti išskiriami prieš skirtingus virusus - tokie antikūnai vadinami kryžminiais antikūnais.

  • Didelis jautrumas. PCR leidžia nustatyti sukėlėjo RNR net minimaliais kiekiais. Tai leidžia atpažinti paslėptąsias infekcijas.
  • Kaip paruošti kraujo donorystę PGR tyrimams

    PCR hepatito C analizei surenkamas veninis kraujas. Paprastai dvi porcijos kraujo paimamos iš paciento venų vienu metu: pirmas siunčiamas į PCR, antras - ELISA. Tai atliekama siekiant tiksliau įvertinti, kiek pacientas yra užsikrėtęs virusu, ir kaip imunitetas kovoja su juo.

    Paprastai pacientas privalo laikytis šių taisyklių:

    • ryte imamas kraujo tyrimas;
    • Intervalas tarp paskutinio maitinimo ir kraujo donorystės turėtų būti nuo aštuonių iki dešimties valandų;
    • dvi ar tris dienas iki analizės reikia atsisakyti keptų ir riebių maisto produktų ir alkoholio;
    • prieš dvidešimt keturias valandas prieš analizę pacientas turėtų vengti fizinio krūvio: nešioti svarsčių, nevaikščioti į sporto salę ar baseiną.

    Susiję Straipsniai Hepatito