Kokybinė ir kiekybinė hepatito C PCR analizė: neigiamas, teigiamas, stenograma

Share Tweet Pin it

Hepatitas C yra virusinė kepenų liga, kurią sukelia flavivirusas HCV (iš anglies hepatito C viruso), kuriame yra ribonukleino rūgšties molekulė (RNR). RNR atlieka genetinį viruso kodą. Jo buvimas leidžia analizuoti hepatito C PCR.

HCV pavojus žmogui priklauso nuo to, kad vadinamasis serologinis langas (laikas tarp infekcijos ir reakcijos iš imuninės sistemos atsiradimo) gali būti gana ilgas - nuo kelių savaičių iki šešių mėnesių.

Tai neaptinka infekcijos ir pradeda gydymą laiku.

Atsižvelgiant į individualias organizmo savybes, HCV nešiotojas gali pasireikšti ūmaus formos ir atsirasti kaip lėtinė liga, dėl kurios reikės ilgo ir brangiai kainuojančio gydymo. Kai nustatomi HCV antikūnai, atliekami serijiniai laboratoriniai tyrimai, įskaitant PCR, skirtą hepatitui C. Šis bandymas atliekamas visiems žmonėms, kurių kraujyje yra antikūnų prieš HCV.

Kas yra PGR analizė?

Laboratorinė hepatito C PCR analizė - biologinės medžiagos tyrimas, siekiant nustatyti flaviruso buvimą.

Polimerazės grandininė reakcija (santrumpa reiškia) rodo kiekybinę organizmo pažeidimo viruso vertę, jo kokybines savybes ir viruso, turinčio RN, genotipą.

Remiantis jų pagrindu ir papildomais tyrimais, nustatomas gydymo metodas ir trukmė bei epidemiologinis veiksnys (perdavimo kitam vežėjui pavojus) laipsnis.

Kas yra Hepatito C RNR analizė?

Hepatito C PCR taip pat vadinamas RNR analize (HCV RNR), nes Flavavirusas turi RNR dalelę, kurios virisonas yra 30-60 nm. Viena iš šio mikroorganizmo savybių yra didelė tendencija mutacijoms.

Kiekvienas viruso porūšis (genotipas) turi skirtingą pasipriešinimą, dėl kurio atsiranda skirtingi gydymo būdai ir paciento tolesnės prognozės pobūdis.

Biologinė medžiaga (veninis kraujas) yra tuščiame skrandyje ir paprastai tiriama realaus laiko PGR metodu (labai jautri realaus laiko diagnozė, kai aptikimo riba yra mažesnė kaip 15 TV / ml, naudojant uždarąsias automatizuotas sistemas).

Yra ir kitų testų, pavyzdžiui, COBAS AMPLICOR, kurio jautris yra 50-100 TV / ml. Bet kokiam laboratoriniam tyrimui svarbi jautrumo riba, t. Y. reagento gebėjimas aptikti minimalią viruso koncentraciją biologinėje medžiagoje.

Hepatito C analizės tipai PGR metodu

Hepatito C PCR apima tris svarbius komponentus:

  • kokybinė analizė;
  • kiekybinė analizė;
  • genotipavimas.

Šie testai leidžia nustatyti viremijos pobūdį, taip pat genetines patogeno savybes. Priklausomai nuo diagnostinės sistemos jautrumo, tyrimas atliekamas vieną kartą, o kartais atliekamas antras bandymas su jautresniu reagentu, siekiant patvirtinti ar patikslinti rezultatus.

Aukštos kokybės hepatito C PCR

Hepatito C PCR kokybinis tyrimas yra dar vienas įprastas polimerazės grandininės reakcijos analizės pavadinimas. Standartinis testo jautrumas, leidžiantis aptikti virusų pažeidimus, yra 10-500 TV / ml.

Neigiama hepatito C PCR analizė rodo, kad viruso koncentracija paciento kraujyje yra mažesnė už diagnostinės sistemos jautrumo ribą.

Jei aukštos kokybės PGR duoda atsakymą "neaptiktų", tada vėlesniam gydymui svarbu sužinoti reagento jautrumo ribą.

Baltymų frakcijos flavavirusui pasirodo žymiai vėliau.

Hepatito C kiekybinė PCR

PCR hepatito C kiekybinis rodiklis yra virusinės apkrovos rodiklis, kuris atspindi flaviruso RNR koncentraciją organizme. Tai yra indikatorius, rodantis, kiek viruso RNR fragmentai yra viename kubiniame centimetre kraujo. Hepatito C RNR PCR rezultatai kiekybiniame bandyme įprastinėje sistemoje yra nurodyti tarptautiniais vienetais mililitre (TV / ml) ir gali būti registruojami įvairiais būdais, pavyzdžiui, 1,7 milijono arba 1,700,000 TV / ml.

Pacientams, prieš pradedant gydymą priešvirusiniais vaistais, ir gydymo 12-osios savaitės metu pacientams skiriama kiekybinė hepatito C PCR diagnostika, siekiant įvertinti pasirinkto HCV gydymo metodo rezultatus. Virusinė apkrova leidžia nustatyti tris svarbius ligos rodiklius:

  • užkrečiamumas, t.y. viruso perdavimo rizikos laipsnis iš vieno vežėjo į kitą (kuo didesnis flavirusų RNR koncentracija, tuo didesnė tikimybė užkrėsti kitą asmenį, pavyzdžiui, dėl seksualinio kontakto);
  • gydymo metodas ir veiksmingumas;
  • antivirusinio gydymo trukmė ir prognozė (kuo didesnis viruso kiekis, tuo ilgesnis gydymas).

Kiekybinė hepatito C PCR diagnostika priklauso nuo laboratorinio tyrimo tipo ir jo jautrumo ribos. Apatinė normos riba laikoma rodikliu iki 600 000 TV / ml, vidutinė vertė yra 600 000-700 000 TV / ml. 800 000 TV / ml ir didesnių rezultatų laikoma didelė RNR turinčio viruso koncentracija.

Genotipas

Dėl didelės HCV pobūdžio mutacijų, bandant svarbu nustatyti, kuris viruso genotipas yra paciento kraujyje. Iš viso pasaulyje buvo užregistruoti 11 hepatito C viruso genotipų, kurie apima daugybę porūšių (potipių). Rusijos Federacijos teritorijoje išdalinta 1,2 ir 3.

Hepatito C PCR RNR kartu su genotipacija yra labai svarbi analizės sudedamoji dalis, nes leidžia gydytojui nustatyti viruso atsparumą (atsparumą), parinkti reikiamus vaistus ir nurodyti gydymo kursą.

Genotipas taip pat leidžia netiesiogiai nustatyti kepenų būklę. Pavyzdžiui, 3 HCV genotipas dažnai lydi steatoze, kuriame riebalai kaupiasi organo ląstelėse.

Pesticidų hepatito C (PCR) kraujo tyrimas turėtų sudaryti tokį figūrą, kuri lemia genotipą. Laboratoriniai atsakymai gali reikšti, kad "neįrašyta" - tai reiškia, kad virusas yra žmogaus kraujyje, kurio neaptikta bandymo sistema. Tai gali reikšti, kad genotipas tam tikroje geografinėje vietovėje nėra būdingas. Tokiu atveju turėtumėte pakartoti analizę, turėdami didesnį diagnostinės sistemos jautrumą.

C hepatito PGR analizė

Hepatito C PCR kiekybinio iššifravimo testas gali būti pagrįstas aukščiau pateiktais duomenimis. Gavę laboratorinių tyrimų rezultatus, dažniausiai rašomi šie duomenys:

  • "Rasta" / "nerasta" (aukštos kokybės hepatito C PCR);
  • RNR turinčių frakcijų skaičius, pavyzdžiui, 831.680 ME / ml (kiekybinė PGR analizė);
  • skaičius, kuris lemia HCV genotipą, pavyzdžiui - 1, 2, 3, 4;
  • Bandymo pavadinimas dažniausiai yra realiuoju laiku.

Labiausiai svarbu išgryninti PGR tyrimą dėl hepatito C yra antroji pastraipa, kurioje parodyta viruso apkrova, kuri lemia prognozę, gydymo metodą ir trukmę.

Jei PGR testas hepatito C yra neigiamas, ELISA testas yra teigiamas - ką tai reiškia?

Jei norite iššifruoti laboratorinius tyrimus, svarbu susisiekti su hepatologu arba infekcinių ligų specialistu, kuris paaiškins gautą informaciją pagal diagnostinės sistemos tipą ir jo jautrumo ribą. Medicinos praktikoje yra daug duomenų apie kraujo tyrimus, kurie gali klaidinti asmenį be medicininio išsilavinimo.

Pavyzdžiui, jei hepatito C PCR testas yra neigiamas ir ELISA testas yra teigiamas, tai gali reikšti, kad šiuo metu paciento kraujyje HCV nėra, tačiau anksčiau jis patyrė ūmę hepatito C formą. Manoma, kad teigiamas fermentais susietas imunosorbento tyrimas (ELISA) rodo, kad kraujyje yra antikūnų, kurie buvo pagaminti praeityje po viruso invazijos. Tačiau šiuolaikinėje medicinos praktikoje ELISA tyrimas laikomas nepakankamai patikimu ir dažnai pateikia netipinius rezultatus, todėl gydytojai jį naudoja kaip pagrindinį tyrimą. Diagnozuojant ligą, specialistai vadovaujasi tiksliai PCR tyrimais.

Naudingas video

Šiame vaizdo įraše pateikiamas labai detalus ir įdomus PGR metodo esmės aprašymas, kaip atliekama analizė:

Išvada

Pavyzdžiui, kai analizuojamas C hepatito C PCR, paprastai vartojamas veninis kraujas. Dažniausiai dvigubai imama biologinė medžiaga - ELISA ir tiesiogiai PCR tyrimui. Siekiant teisingų bandymų rezultatų, būtina laikytis pagrindinių biologinės medžiagos mėginių ėmimo taisyklių:

  • kraujas analizuojamas pirmosios dienos pusėje ant tuščio skrandžio;
  • tarp valgio ir kraujo mėginių ėmimas turi užtrukti mažiausiai 8 valandas;
  • Prieš pradedant tyrimą, taip pat reikėtų pašalinti alkoholį ir kepinius;
  • per dieną prieš kraujo donorystę būtina išvengti didelio fizinio krūvio.

Kraujo tyrimo rezultatai paprastai yra paruošti kitą dieną.

Hepatito C viruso diagnozė

Hepatito C virusas (HCV) yra RVN turintis virusas iš Flaviviridae šeimos. Ši infekcija gali daugintis kraujo ląstelėse (monocitų, neutrofilų, B limfocitų ir makrofagų), taip pat veikia pačios kepenų ląsteles - hepatocitus. Dėl aukšto mutacijų aktyvumo šio tipo hepatitas gali išvengti poveikio žmogaus imuninei sistemai.

Yra 11 genetų ir tokio viruso potipių masė, kuri skiriasi laipsniu kepenų pažeidimo ir veikia hepatito gydymo trukmę. Toks įvairovė hepatito C reikalauja įvairių antivirusinių terapijų. Pavyzdžiui, 1 ir 4 hepatito genotipai turi būti gydomi 48 savaites, o gydymo kursas nuo 2 ir 3 tipo virusų - gali trukti tik 24 savaites.

Po to, kai greitas hepatito C tyrimas parodė teigiamą rezultatą, atliekama PGR analizė, siekiant aptikti viruso RNR kraujo mėginiuose.

PGR diagnostika

Polimerazės grandininė reakcija (PCR) yra eksperimentinė virusų aptikimo technologija. Toks hepatito C tyrimas gali žymiai padidinti tam tikrų DNR fragmentų ar viruso RNR koncentraciją paimtuose mėginiuose. Tai leidžia juos atpažinti ir net skaičiuoti.

Šis hepatito C testas atliekamas pagal šią procedūrą:

  1. Į mėgintuvėlį įterpiamas kraujo mėginys (genetinė medžiaga), kuriame gali būti norimo hepatito geno. Jame yra specialios medžiagos, gruntai, jie yra trumpo ilgio segmentai iš norimo geno, kurie yra chemiškai sintetinti. Šiam indui taip pat pridedama DNR arba RNR polimerazė, ji gali sukurti nukleino rūgšties grandines, kurios visiškai identiškos originalui. Gautoms kompozicijoms pridedama laisvų nukleotidų, kurie yra specialios DNR ir RNR statybinės medžiagos, rinkinys, o viename iš jų yra nedidelių radioaktyviojo fosforo dalelių.
  2. Gautas mišinys iš pradžių šildomas iki 95 laipsnių, dėl kurio atskiedžiamos abi DNR spiralės, susipynusios įprastoje būsenoje.
  3. Norint tęsti analizę, vaistas yra aušinamas, o tuo pačiu metu gruntai pridedami prie norimo hepatito viruso genomo sekcijos, užkertant kelią DNR formavimui į dvigubą spiralę. Kai mišinys atšaldomas, polimerazė ieško viengubų nukleotidų grandžių. Šio fermento pritvirtinimo metu jis nuslysta išilgai DNR grandinės (kaip virvės virve esantis blokas), o ant dvigubos spiralės jis negali "dirbti", todėl mišinys šildomas.
  4. Norėdami pailginti analizę, atliekamas pakartojimas, o tai vėl sukelia nukleotidų grandinių atskyrimą. Kai tokie PGR ciklai atliekami mėginyje, norimų hepatito genų skaičius padidėja geometrine proporcija, o likusios genetinės medžiagos gaminamos (formuojamos) tik linijiniu būdu.
  5. Norint užbaigti tyrimą, tirpalas išvalomas iš likusių nukleotidų dalelių. Jie yra atskirti elektroforezės būdu, atskyrę pagal DNR grandinės molekulinės masės parametrus. Tokie hepatito C tyrimai naudojant PCR leidžia nustatyti, ar mėginiai yra norimi virusiniai genai, ar ne.

Šio bandymo privalumas yra labai aukštas PGR reakcijos slenkstis. Tokia diagnozės technika, idealiu atveju, reikalinga tik vienam viruso genomui visam imties atvejui.

Be to, ši PGR yra visiškai specifinė. Kiekviename genelyje yra unikali nukleotidų seka, kuri, kaip ir pirštų atspaudai, niekur negali būti kartojama. Šiai hepatito C analizei sintezuojami pradmenys, kad jie visiškai atitiktų unikalius ieškomų genų regionus, kurių jokia kita seka nėra.

Ši technika taip pat leidžia jums analizuoti hepatito C ir juos nustatyti, padedant nustatyti galutinę diagnozę.

Toks laboratorinis tyrimas suteikia daugiau informacijos negu tik apie hepatito C viruso ar kito tipo RNR buvimą ar nebuvimą kraujo mėginiuose. Nustatant radioaktyviosios spinduliuotės parametrą, galima nustatyti, kiek pageidaujamos genetinės medžiagos buvo iš pradžių tiriamame mėginyje. Tai leidžia jums nustatyti vadinamojo viruso apkrovos parametrą - tam tikro tūrio hepatito RNR dalelių koncentraciją.

PGR kokybinė analizė

Ši analizė leidžia nustatyti hepatito B viruso buvimą kraujo mėginiuose. Tai turėtų būti atliekama visiems žmonėms, kuriems nustatyta hepatito antikūnų.

Tokių tyrimų rezultatas gali būti tik dvi vertybės:

  • "Aptikta". Toks teigiamas testo rezultatas interpretuojamas taip: analizuojamame imtyje buvo rasta hepatito viruso RNR fragmentų iš biologinių medžiagų. Iš to išplaukia, kad pacientas buvo užsikrėtęs šiuo virusu. Tai gali reikšti, kad patogeninis hepatitas dauginasi organizme ir infekuoja naujas ląsteles, sunaikina kepenis.
  • "Nenustatyta". Šis rezultatas sako, kad bandinyje, kuris buvo analizuojamas šioje laboratorijoje, nebuvo aptikta jokių RNR fragmentų, kurie yra būdingi hepatito C virusui. Taip pat yra galimybė, kad patogeno viruso RNR koncentracija bandomajame mėginyje yra tokia maža, kad tyrimas jo negalėjo aptikti.. Tokiais atvejais sakoma, kad koncentracijos lygis yra mažesnis už bandymo jautrumo ribą.

Toks tyrimas taip pat gali būti klaidingai teigiamas arba klaidingai neigiamas dėl biologinės medžiagos užteršimo ar tam tikrų cheminių medžiagų, kurios reikalingos analizei, reaguoti į mėginius.

Reikėtų pabrėžti, kad hepatito C ūmių fazių metu kokybinis tyrimas naudojant PCR metodą gali aptikti jo RNR po 1-2 savaičių nuo organizmo užkrėtimo momento. Tai reiškia, kad ligą galima nustatyti ilgai, kol atsiranda išorinių simptomų ar antikūnų prieš hepatritą organizme atsiradimas.

Kraujo mėginių ėmimas (iš venų) geriausia tuščiam skrandžiui.

PCR kiekybinė analizė

Naudodamiesi šia analize, nustatykite hepatito viruso koncentracijos lygį paciente (viruso apkrova). Tokio bandymo turi būti atliktas, norint įvertinti viruso RNR kiekį tam tikro tūrio vienetui.

Šio metodo atliktais hepatito C iššifravimo tyrimais gali būti tokie rezultatai:

  • Kiekybinis rodiklis (skaičiais)

Viruso koncentracija (suma) pateikta skaičiais. Tam naudojami skirtingi matavimo vienetai: arba IU / ml (tarptautinis vienetas mililitre), arba kopijos / ml (viruso RNR viename mililitre kopijų skaičiaus). Vidutiniškai 1 TV / ml atitinka 4 kopijas / ml, nes skirtingoms bandymų sistemoms tokie vienetai turi skirtingus perskaičiavimo koeficientus.

Manoma, kad žemos virusinės apkrovos vertės yra mažesnės kaip 400 000 TV / ml, o didelė yra 8 000 000 TV / ml.

Toks kiekybinis vertinimas leidžia nustatyti ligos infekcijos lygį ("infekcinį") lygį. Kuo daugiau šio analizės rodiklio, tuo didesnė tikimybė, kad patogenukas gali būti perduotas kitiems žmonėms (seksualiniu ryšiu arba vertikaliai).

Šis nuosprendis reiškia, kad kiekybinis metodas negali aptikti hepatito RNR, tačiau pats virusas yra organizme, tik labai mažose koncentracijose. Tai patvirtinta papildoma kokybine PGR analizė, o jo teigiamas rezultatas liudija apie hepatito buvimą.

  • Rezultatas nenustatytas

    Šis teigiamas analizės aiškinimas leidžia manyti, kad pats kiekybinis testas kraujo mėginyje negali aptikti specifinių hepatito C viruso RN dalelių.

  • Kiekybinė PGR analizė, atlikta įvairiais antivirusinio gydymo laikotarpiais (1, 4, 12 ir 24 savaites), leidžia mums įvertinti gydymo veiksmingumą ir padaryti reikiamus pakeitimus.

    Analizės ypatumai

    Šis testas turi būti atliktas siekiant nustatyti skirtingus hepatito C genotipus. Šiuo metu yra 11 genotipo šio patogeno ir daugelio potipių. Mūsų šalyje yra 1, 2 ir 3 rūšių hepatito C genotipai. Laboratorijose jie gali identifikuoti įvairius šių rūšių potipius: 1a, 1b, 2a, 2b arba 3, 4, 5, 6 genotipai su įvairiais potipių modifikacijomis. Visų šių hepatitų atveju nustatymo specifiškumas yra 100%.

    Nustatant genotipo pakeitimą, galima pasirinkti tinkamą gydymą. Tam tikro tipo genotipo buvimas pacientui neleidžia manyti, kad liga yra lengviau ar sudėtingesnė, tai yra tik hepatito viruso rūšys, o ne daugiau.

    Tais atvejais, kai viruso genotipas negali būti izoliuotas laboratorijoje, rezultatas gali būti pateiktas: "Nenurodyta. Buvo tiriami genotipai: tokie ir tokie "(pavyzdžiui, 1a, 2c, 3av). Šis dekodavimas rodo, kad šioje laboratorijoje nebuvo tinkamų reagentų, kurie galėtų nustatyti hepatito viruso genotipą. Tyrime buvo ištirti virusai, sąrašo duomenys, tačiau jų atitiktis RNR mėginiams nebuvo nustatyta.

    Norėdami atlikti galutinę diagnozę, nepakanka tik vieno tipo analizės. Kiekvienas bandymas gali sukelti klaidingą teigiamą rezultatą. Norint tiksliai nustatyti hepatito tipą ir šio kūno uždegimo žalą, atlikite išsamų tyrimą. Tai atlikta kepenų biopsija ir išbandomi jos fermentai: ALT, ASAT, taip pat šarminės fosfatazės ir LDH. Taip pat galima atlikti bilirubino testą ir protrombino indekso analizę.

    Tik tokių testų ir laboratorinių tyrimų, kurių bendra paciento būklės analizė, rinkinys padės nustatyti hepatito buvimą organizme, jo formą ir sunkumą. Remiantis jų pagrindu, gydytojas gali nustatyti tolesnį gydymą ir pateikti galimą paciento prognozę.

    HCV, RNR kiekis [realaus laiko PGR]

    Tyrimas, skirtas hepatito C (HCV) sukėlėjui nustatyti, kurio metu kraujo mėginyje nustatomas viruso genetinės medžiagos (RNR) kiekis ir kiekis (viruso kiekis) naudojant realaus laiko polimerazės grandininės reakcijos metodą (RT-PCR).

    HCV RNR gali būti aptikta esant koncentracijai, viršijančiam linijinės koncentracijos intervalo apatinę ribą. Linijinis koncentracijos diapazonas - tai diapazonas, pagal kurį galite tiksliai apskaičiuoti patogenų kopijų skaičių. Šiai analizei nustatyta, kad detektorinio stiprintuvo nustatytas HCV DNR koncentracijos tiesinis diapazonas yra 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 kopijų / ml mėginio.

    Rusų sinonimai

    Hepatito C virusas (HCV), kiekybinis RNR nustatymas.

    Anglų kalbos sinonimai

    Hepatito C viruso RNR, kiekybinis realaus laiko PCR, kraujo, HCV viruso apkrova, hepatito C viruso RNR Quant.

    Tyrimo metodas

    Realaus laiko atvirkštinės transkriptazės polimerazės grandininė reakcija.

    Kokią biomasę galima naudoti moksliniams tyrimams?

    Kaip pasirengti studijoms?

    Nerūkykite 30 minučių prieš kraujo davimą.

    Bendra informacija apie tyrimą

    Hepatito C virusas (HCV) yra RVP virusas iš Flaviviridae šeimos, kuri užkrečia kepenis. Jis gali daugintis kraujo kūnelių (neutrofilų, monocitų ir makrofagų, B limfocitų) ir sukelti krioglobulinemiją, Sjogreno ligą ir B-ląstelių limfoproliferacines ligas. Dėl savo didelio mutacijų aktyvumo HCV gali išvengti imuninės sistemos apsauginių mechanizmų poveikio. Yra 6 genotipai ir daugelis viruso potipių, kurie turi skirtingą reikšmę prognozuojant ligos vystymąsi ir antivirusinio gydymo veiksmingumą.

    Pagrindinis perdavimo būdas yra per kraują (kraujo ir plazmos perpylimo vaistai, donorų organai, nesterilūs švirkštai, adatos, tatuiruočių priemonės, auskarų vėrimas). Tikėtina, kad infekcija per lytinius santykius ir kūdikis iš motinos gimdymo metu, tačiau tai įvyksta retai.

    Ūminis virusinis hepatitas paprastai būna besimptomiškas ir daugeliu atvejų nepastebimas. Tik 15% užsikrėtusių žmonių liga yra ūpi, yra pykinimas, kūno skausmai, apetito trūkumas ir svorio mažėjimas (retai pasireiškia gelta). 60-85% užsikrėtusių žmonių serga lėta infekcija, kuri yra 15 kartų didesnė už lėtinės infekcijos hepatituose B dažnį. Lėtinis virusinis hepatitas C pasireiškia su padidėjusiu kepenų fermentų kiekiu ir silpnomis simptomų pasireiškimu. 20-30% pacientų liga sukelia kepenų cirozę, didina kepenų funkcijos nepakankamumo riziką ir kepenų ląstelių karcinomą.

    HCV RNR nustatymas rodo viruso dauginimąsi organizme ir tai yra ligos diagnozavimo metodas. Virusinė genetinė medžiaga gali būti aptikta PCR 10-12 dienų po infekcijos - šiuo laikotarpiu specifinių antikūnų, susidariusių praėjus keliems mėnesiams po infekcijos, nėra ir kepenų funkcijos biocheminiai rodikliai yra referencinės vertės.

    Per PCR viruso RNR nustatoma kokybiškai arba kiekybiškai. Dėl kokybinio metodo patvirtinamas hepatito C viruso ir jo aktyviosios reprodukcijos buvimas. Kiekybinis viruso kiekio nustatymas atsižvelgiant į HCV genotipą leidžia stebėti nuolatinį gydymą ir prognozuoti ligos eigą.

    Gydymo veiksmingumas vertinamas pagal RNR kiekį prieš gydymą ir jo metu. Paprastai per pirmuosius tris sėkmingo gydymo mėnesius viruso kiekis kraujyje keletą kartų mažėja. Esant veiksmingam gydymui, viremija per pirmąsias 4-12 gydymo savaičių sumažėja dviem dydžiais ir po gydymo pabaigos viruso genetinė medžiaga kraujyje nenustatyta. Viremijos sumažėjimas po 12 savaičių nuo gydymo pradžios rodo jo neveiksmingumą. Buvo rekomenduojama atlikti analizę prieš gydymo pradžią, 4, 12 ir 24 gydymo savaites ir 24 savaites po gydymo pabaigos. Terapijos trukmė ir hepatito C viruso RNR kiekybinio nustatymo dažnumas priklauso nuo viruso genotipo ir kepenų pažeidimo laipsnio.

    Kas naudojamas moksliniams tyrimams?

    • Patvirtinti "virusinio hepatito C" diagnozę.
    • Nustatyti viruso hepatito C kursą.
    • Stebėti antivirusinį gydymą ir nuspręsti dėl tolesnės gydymo taktikos.

    Kada planuojamas tyrimas?

    • Kokybiškai nustatant hepatito C RNR.
    • Ūmus ir lėtinis virusinis hepatitas C.
    • Kai mišrus hepatitas.
    • Planuojant, antivirusinio gydymo pabaigoje ir po jo.

    Ką reiškia rezultatai?

    • Nenustatyta - nėra nustatyta hepatito C viruso RNR arba jo vertė yra mažesnė už metodo jautrumo ribą (200 kopijų / ml = 400 TV / ml).
    • kopijos / ml (TV / ml) - aptikta hepatito C viruso RNR. Žemas viremija (labiausiai palanki ligos progresija ir gydymo veiksmingumas).
    • > 2 * 10 ^ 6 kopijos / ml (> 4 * 10 ^ 6 TV / ml) - nustatoma hepatito C viruso RNR. Aukšta viremija.
    • > 1,0 * 10 ^ 8 kopijos / ml (> 2 * 10 ^ 8 TV / ml) - hepatito C viruso RNR nustatoma esant koncentracijai virš linijinės koncentracijos intervalo.

    Linijinis C hepatito C viruso RNR koncentracijos diapazonas, nustatytas detektoriniu stiprintuvu, yra 7,5 * 10 ^ 2 - 1,0 * 10 ^ 8 kopijų / ml (1,5 * 10 ^ 3 - 2 * 10 ^ 8 TV / ml).

    Kas gali turėti įtakos rezultatui?

    Nepatikimus rezultatus galima gauti su:

    • biomaterialinis užterštumas;
    • inhibitorių buvimas imtyje - cheminės ir baltymų medžiagos, turinčios įtakos įvairiems PGR komponentams;
    • heparino buvimas kraujyje.

    Svarbios pastabos

    • Viruso kraujo krūvio lygis nenurodo kepenų pažeidimo laipsnio ir ligos sunkumo laipsnio. Norint juos įvertinti būtina ištirti biocheminius parametrus ir biopsijos medžiagas.
    • Planuojant gydymą labai svarbu nustatyti hepatito C viruso genotipą.

    Taip pat rekomenduojama

    Kas atlieka studijas?

    Literatūra

    • Zh.I. Vozianova Infekcinės ir parazitinės ligos: 3 tonomis. - K.: sveikata, 2000. - 1 tomas: 600-690.
    • Kiskun A. A. Imunologiniai ir serologiniai klinikinės praktikos tyrimai. - М.: ООО МВД, 2006. - 471-476 psl.
    • Harisono vidaus medicinos principai. 16-asis leidimas NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
    • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F ir kt. Hepatito C viruso in vivo ląstelėse yra viruso, viruso genotipo ir ląstelių fenotipo įtaka. Kraujas. 1998 m. Gegužės 15 d.; 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
    • Revie D, Salahuddin SZ. Žmogaus ląstelių tipai hepatito C viruso replikacijai in vivo ir in vivo: seni teiginiai ir dabartiniai įrodymai. Virol J. 2011 Lie 11; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

    PGR tyrimas hepatitui C: tipai, indikacijos, stenograma

    Virusinis hepatitas C yra rimta liga, atsirandanti dėl kepenų pažeidimo. Aštuoniasdešimt procentų pacientų jis tampa lėtinis. Virus dauginasi kepenų ląstelėse - hepatocitų - ir sukelia jų mirtį. Negyvas audinys yra pakeičiamas jungiamojo audinio kampeliais, išsivysto fibrozė.

    Kuriant fibrozę, kepenys negali atlikti savo funkcijų, prasideda kepenų cirozė, kuri dėl savo komplikacijų yra pavojinga: padidėjęs slėgis vartų venoje, kraujavimas iš virškinimo trakto, kraujo krešėjimo sutrikimas, psichiniai pokyčiai dėl galvos smegenų branduolių.

    Ligos priežastis yra infekcija, kurią sukelia Flaviviridae šeimos virusas, priklausantis RNR viruso rūšiai. Tai reiškia, kad genetinė medžiaga, kuria sintezuojami patogeno baltymai, yra užkoduota ribonukleino rūgšties molekulėje. Infekcija pasireiškia per kraują, lytiniu būdu ir nuo nėščios moters iki vaisiaus. Deja, tarp infekcijos ir antikūnų gamybos pradžios gali praeiti pakankamai daug laiko - nuo dviejų savaičių iki šešių mėnesių. Tai neleidžia nustatyti infekcijos imunologiniu tyrimu ir pradėti gydymą ankstyvosiose stadijose.

    Kas yra PGR analizė?

    PGR yra molekulinės analizės metodas, leidžiantis nustatyti patogeno genetinę medžiagą jau pirmąją savaitę po infekcijos, naudojant polimerazės grandininę reakciją. Tyrimas turi aukštą specifiškumą, tikslumą ir leidžia ne tik nustatyti viruso buvimą ar jo nebuvimą, bet ir jo koncentraciją bei genotipą.

    Tyrimui imamas paciento kraujas, kuriame potencialiai gali būti viruso RNR. Į kraują dedama pradmenų - dirbtinai sintezuoti norimo mažo ilgio geno regionai, o RNR polimerazė yra specifinis fermentas, kuris pakartotinai padidina patogenų genetinės medžiagos kiekį. Naudojant specialų įrenginį, atliekami keli šildymo ir vėsinimo ciklai. Tada medžiaga analizuojama ir lyginama su žinomais viruso genais, dėl kurių daroma išvada apie infekcijos buvimą ar nebuvimą.

    Hepatito C PCR analizės tipai

    Yra trys PGR analizės tipai:

    1. PGR kokybinė analizė. Pirmasis tyrimo etapas. Tai leidžia jums nustatyti genetinę viruso medžiagą kraujyje.

  • Kiekybinė PGR analizė. Leidžia nustatyti viruso kiekį - patogenelio genetinės medžiagos koncentraciją viename mililitre kraujo. Šis tyrimas atliekamas prieš gydymo pradžią, tada pirmoje, ketvirtoje, dvyliktoje ir (jei kursas yra ilgas) dvidešimt ketvirtą gydymo savaitę, kad būtų įvertintas jo veiksmingumas.

  • Genotipas Hepatito C sukėlėjas dažnai ir greitai mutavo. Šiame plane buvo rasti septyni šio viruso genotipo variantai. Rusijoje pirmasis, antrasis ir trečias tipai yra įprasti. Kiekvienas genotipas turi skirtingą atsparumą gydymui, pavyzdžiui, pirmojo tipo gydymo veiksmingumas yra šešiasdešimt procentų, o antruoju ir trečiuoju - šis skaičius siekia aštuoniasdešimt penkis. Todėl, norint pasirinkti tinkamus vaistus ir nustatyti gydymo trukmę pakankamai ilgai, būtina tiksliai nustatyti, kokio tipo virusas pacientas yra užsikrėtęs.
  • Indikacijos hepatito C PCR analizei

    PGR tyrimas nustatomas šiais atvejais:

    • kontaktas su ligoniu, su kuriuo gali pasireikšti infekcija;
    • teigiamas fermentinis imuninis tyrimas;
    • cirozės požymiai: kepenų dydžio pokyčiai, blužnies išsiplėtimas, poodinio veninio audinio išvaizda pilve;
    • kepenų pažeidimo simptomų atsiradimas: skausmas dešinėje pilvo srityje, odos pageltimas;
    • padidėjęs ALT ir AST aktyvumas kraujo biocheminiuose tyrimuose;
    • prieš pradedant gydymą nustatyti viruso kiekį;
    • stebėti antivirusinio gydymo veiksmingumą;
    • po gydymo kontroliuoti atsinaujinimą;
    • esant diagnozuotam hepatitui B, pašalinti keletą kepenų pažeidimų.

    Paaiškinimas apie hepatito C PCR tyrimus

    Gripo hepatito C dekodavimo PGR analizė ir fermentinis imuninis tyrimas turi būti atliekamas hepatologo ar infekcinių ligų specialisto. PGR analizė yra būtina kartu su kraujo, biopsijos ir ultragarsu biocheminių tyrimų duomenimis. Tik kvalifikuotas gydytojas galės analizuoti tyrimų rezultatus ir, remdamasis jais, nustatyti tinkamą gydymą.

    Kokybinės analizės dekodavimas.

    Analizuotoje biologinėje medžiagoje rasti patogenų genetinė medžiaga. Infekcija patvirtinta.

    Infekcijos nėra arba patogenų RNR kiekis yra mažesnis už jautrumo ribą.

    Dekodavimo kiekybinė analizė.

    Normalus greitis sveikiems žmonėms. Tai reiškia, kad tiriamoje medžiagoje nėra hepatito C RNR arba jo koncentracija yra mažesnė už tyrimo jautrumo ribą.

    RNR koncentracija yra mažesnė už kiekybinio įvertinimo diapazoną. Šie rezultatai yra labai atidžiai interpretuojami, susiejami su kitų studijų duomenimis, dažnai pakartotinai mokomi.

    Viruso apkrova tam tikroje koncentracijoje yra maža. Paprastai viruso kiekio sumažėjimas reiškia, kad gydymas yra sėkmingas.

    Daugiau nei 8 * 10 ^ 5 TV / ml

    Viruso lygis tam tikroje koncentracijoje yra didelis.

    Daugiau nei 2,4 * 10 ^ 7 TV / ml

    RNR kiekis viršija kiekybinio nustatymo intervalo viršutinę ribą. Dėl šio rezultato neįmanoma padaryti išvadų apie viruso apkrovos laipsnį. Paprastai tokiais atvejais bandymas kartojamas su kraujo mėginio skiedimu.

    Dekodavimo genotipas.

    Aptikta tam tikro genotipo RNR

    Biomateriale nustatytas tam tikro genotipo ir potipio hepatito C virusas. Rezultatas užkoduotas romėniškuosius skaitmenimis ir lotyniškomis raidėmis, pvz., 1a, 2b. Iš viso yra septyni genotipai ir šešiasdešimt septyniai potipiai, tačiau Rusijoje yra tik trys pirmieji tipai.

    Aptikta hepatito C viruso RNR

    RNR buvo rasta retos genotipo kraujyje Rusijoje, kurio negalima priskirti prie pirmojo, antrojo ar trečiojo tipo. Reikia daugiau mokslinių tyrimų.

    Šis rezultatas rodo, kad pacientas yra sveikas arba kad patogeno RNR kiekis yra per mažas.

    Gali būti, kad hepatito C PCR analizė yra neigiama, o su fermentais susieta imunosorbento analizė atpažįsta antikūnus prieš virusą. Tai reiškia, kad pacientui pasireiškė ūmus hepatitas C ir atsigavo pats. Maždaug dvidešimt infekcijos atvejų atsiranda spontaniškai, jei paciento organizmas yra pakankamai atsparus infekcijai.

    Nors PCR yra labai tiksli analizė, jos rezultatai gali būti iškraipyti šiose situacijose:

    • kraujas buvo perkeltas į laboratoriją netinkamomis sąlygomis, temperatūra buvo pažeista;
    • biomaterialas bandinys buvo užterštas;
    • heparino ir kitų antikoaguliantų kraujyje likučiai buvo likę;
    • Nustatyta, kad tyrėjai yra inhibitoriai - medžiagos, kurios sulėtins arba sustabdo polimerazės grandininę reakciją.

    PGR privalumai naudojant kitus metodus

    1. Diagnozė ankstyvosiose stadijose. PCR aptinka genetinę sukėlėjo medžiagą. Naudojant imunofluorescencijos analizę, galima nustatyti tik imunoglobulinus - medžiagas, kurias organizmas gamina reaguodamas į infekciją. Jei užsikrėtė hepatitu C, intervalas tarp infekcijos ir imuninio atsako pradžios gali būti keletas savaičių ir mėnesių, tuo metu ELISA tyrimas bus neveiksmingas. PCR atsakys per pirmąją savaitę po infekcijos.

  • Maža klaidų tikimybė. Tiriamoje medžiagoje nustatomas genetinės medžiagos plotas, būdingas tik vienam patogenų tipui. Tai pašalina klaidingus rezultatus. Kai ELISA klaidos yra įmanomos, kadangi tos pačios rūšies antikūnai gali būti išskiriami prieš skirtingus virusus - tokie antikūnai vadinami kryžminiais antikūnais.

  • Didelis jautrumas. PCR leidžia nustatyti sukėlėjo RNR net minimaliais kiekiais. Tai leidžia atpažinti paslėptąsias infekcijas.
  • Kaip paruošti kraujo donorystę PGR tyrimams

    PCR hepatito C analizei surenkamas veninis kraujas. Paprastai dvi porcijos kraujo paimamos iš paciento venų vienu metu: pirmas siunčiamas į PCR, antras - ELISA. Tai atliekama siekiant tiksliau įvertinti, kiek pacientas yra užsikrėtęs virusu, ir kaip imunitetas kovoja su juo.

    Paprastai pacientas privalo laikytis šių taisyklių:

    • ryte imamas kraujo tyrimas;
    • Intervalas tarp paskutinio maitinimo ir kraujo donorystės turėtų būti nuo aštuonių iki dešimties valandų;
    • dvi ar tris dienas iki analizės reikia atsisakyti keptų ir riebių maisto produktų ir alkoholio;
    • prieš dvidešimt keturias valandas prieš analizę pacientas turėtų vengti fizinio krūvio: nešioti svarsčių, nevaikščioti į sporto salę ar baseiną.

    Kas yra hepatito C RNR?

    Hepatito C viruso RNR tyrimas yra svarbiausia procedūra, leidžianti tiksliai nustatyti pacientų gydymo trukmę ir metodus. Ligos diagnozę sudaro keletas skirtingų kraujo tyrimų, tokių kaip:

    • hepatito C žymenys (anti-HCV);
    • hepatito C viruso RNR (HCV RNR) nustatymas.

    Pirmasis tyrimas atliekamas po pirmojo įtarimo dėl hepatito. Antrasis variantas yra svarbiausias HCV RNR gydymas, todėl jį reikia išsamiau išnagrinėti.

    Kas yra virusinis hepatitas C?

    Virusinis hepatitas C arba HCV yra užkrečiama liga, kuri veikia kepenis. Infekcija su virusu vyksta per kraują. Jūs galite užsikrėsti atliekant kraujo perpylimą, kai nesilaikoma medicininių instrumentų sterilizavimo taisyklių. Retais atvejais yra atvejų, kai liga gaunama lytiniu būdu arba nuo nėščios motinos iki vaisiaus. Hepatitas C gali būti dviejų tipų.

    Lėtinis hepatitas C yra labiausiai pavojingas. Tai ligos forma, kuri gali trukti visą gyvenimą. Tai sukelia rimtus kepenų funkcijos sutrikimus, pvz., Cirozę ar vėžį. 70-90% užsikrėtusių žmonių liga tampa lėtinė.

    Svarbiausias hepatito C pavojus yra tai, kad jis vyksta slaptai, be piktybinių požymių. Tuo pačiu metu jie dažniausiai skundžiasi dėl karščiavimo, pykinimo ir vėmimo, fizinio silpnumo, padidėjusio nuovargio, apetito praradimo ir svorio. Tuo pačiu metu, dėl nedidelio kepenų audinio kietėjimo, gana dažnai atsiranda piktybinė degeneracija. Dėl šios priežasties hepatitas C dažnai vadinamas "laiko bomba" arba "švelnus žudikas".

    Kitas ligos požymis yra jos lėtas vystymasis, apskaičiuotas per daugybę metų.

    Paprastai tie, kurie užsikrėtę, nemano jokių simptomų ir nežino apie jų tikrąją būklę. Dažnai liga gali būti aptikta tik susisiekiant su gydytoju kitame objekte.

    Rizika apima:

    • vaikai, kurie iš savo motinos gavo hepatito C virusą;
    • priklausomiems asmenims;
    • žmonės, kurie perverdavo kūno dalis arba tatuiruotės nesteriliomis priemonėmis;
    • donoro kraujo ar organų gavimas (iki 1992 m., kai hemodializė nebuvo atlikta);
    • ŽIV užsikrėtusiems žmonėms;
    • medicinos personalas, susilietęs su užsikrėtusiais pacientais.

    Hepatito C RNR nustatymas

    Hepatito C viruso RNR apibrėžimas, taip pat vadinamas hepatito C PCR, yra biologinės medžiagos (kraujo) tyrimas, kuris gali būti naudojamas norint nustatyti pačią paties hepatito viruso genomaterialo buvimą organizme (bet kuris atskiras virusas yra viena RNR dalis).

    Pagrindinis tyrimo metodas yra PCR arba polimerazės grandininės reakcijos metodas.

    HCV RNR yra dviejų tipų kraujo tyrimai:

    Kokybės tyrimas

    Kokybinės analizės atlikimas leidžia nustatyti, ar virusas yra kraujyje. Visi pacientai, kuriems buvo nustatyti C hepatito antikūnai, turi išlaikyti šį testą. Remiantis jo rezultatais, galite gauti 2 atsakymus: "šiuo metu" arba "nėra" viruso. Teigiamu testo rezultatu (nustatoma) galima spręsti apie viruso, kuris infekuoja sveikas kepenų ląsteles, aktyvią reprodukciją.

    Tyrimas, atliktas naudojant aukštos kokybės PGR, nustatomas pagal konkretų jautrumą - nuo 10 iki 500 TV / ml. Jei hepatito virusas aptiktas kraujyje, kurio specifinis kiekis yra mažesnis nei 10 TV / ml, viruso aptikimas gali tapti neįmanomas. Labai mažas specifinis viruso kiekis pastebimas tarp pacientų, kuriems buvo skiriamas antivirusinis gydymas. Todėl svarbu, kad medicinos sistemos jautrumas būtų didelis, kad diagnozuotų ir nustatytų kokybinį rezultatą polimerazės grandinės reakcijoje.

    Dažnai C-hepatito polimerazės grandininė reakcija atliekama iškart po atitinkamų antikūnų nustatymo. Tolesni testai, atliekami antivirusinio gydymo metu, atliekami 4, 12 ir 24 savaites. Kita analizė po HTP nutraukimo atliekama po 24 savaičių. Tada - kartą per metus.

    Kiekybinis testas

    Kiekybinė PGR RNR analizė, kartais vadinama viruso apkrova, nustato viruso koncentraciją (specifinį turinį) kraujyje. Kitaip tariant, virusinė apkrova apibrėžiama kaip tam tikras virusinės RNR kiekis, kuris gali būti tam tikrame kraujo kiekyje (paprastai yra 1 ml, lygus 1 cm kubo). Bandymų rezultatų vienetai yra tarptautiniai (standartiniai) vienetai, padalinti iš vieno mililitro (TV / ml). Viruso turinys kartais atrodo skirtingai, tai priklauso nuo laboratorijų, kuriose atliekami tyrimai. Dėl hepatito C kiekybinis nustatymas kartais naudoja tokias vertes kaip kopijos / ml.

    Turite suprasti, kad nėra specifinės priklausomybės nuo C hepatito sunkumo nuo šio štamo koncentracijos kraujyje.

    Patikrinkite "virusų pakrovimas" leidžia nustatyti ligos infekcijos laipsnį. Taigi, rizika užsikrėsti kitą asmenį virusu didėja, kai padidėja hepatito koncentracija kraujyje. Be to, didelis viruso kiekis sumažina gydymo poveikį. Todėl mažas virusų kiekis yra labai palankus veiksnys sėkmingam gydymui.

    Be to, hepatito C testas ir jo nustatymas PCR turi didelę įtaką gydant ligą ir nustatant gydymo sėkmę. Remiantis tyrimų rezultatais, planuojama reabilitacijos programa. Pavyzdžiui, jei specifinė hepatito viruso koncentracija yra per lėta, antivirusinis gydymas yra ilgesnis ir atvirkščiai.

    Šiuolaikinėje medicinoje manoma, kad didesnė nei 800000 ME / ml apkrova. Krovinys, viršijantis 10 000 000 ME / ml, laikoma kritine. Tačiau ekspertai iš skirtingų šalių vis dar neturi tos pačios nuomonės apie viruso apkrovos ribas.

    Kiekybinio testo dažnumas

    Apskritai, kiekybinė hepatito analizė atliekama prieš antivirusinį gydymą ir praėjus 3 mėnesiams po gydymo pabaigos, siekiant nustatyti gydymo kokybę.

    Todėl kiekybinis bandymas bus laikomas kiekybiniu pirmiau nurodyto pavyzdžio rezultatų įvertinimu. Todėl bus paskelbtas nuosprendis "žemiau matavimo ribos" arba "neaptiktas kraujyje".

    Kokybinio tyrimo jautrumo parametras paprastai yra mažesnis už kiekybinės analizės jautrumą. "Trūkstamas" sintezė rodo, kad abiejų tipų tyrimai nerado viruso RNR. Su bandymo indikatoriumi "žemiau išmatuoto diapazono", kiekybinės tipo analizė greičiausiai nerado hepatito RNR, nors tai patvirtina ir labai mažo specifinio turinio viruso buvimą.

    Hepatitas C ir jo genotipai

    Hepatito C viruso RNR genotipas nustato įvairių genetinių hepatito C tipų buvimą. Mokslui žinoma daugiau nei 10 rūšių viruso genomo, tačiau medicinos praktikoje pakanka atskirti keletą genotipų, kurių regione yra didžiausia dalis. Genetinio tipo nustatymas atlieka pagrindinį vaidmenį pasirenkant gydymo laiką, o tai yra labai reikalinga, jei atsižvelgsite į didelį šalutinį vaistų poveikį hepatitui.

    Virusinio hepatito C gydymo metodai

    Paprastai vienintelis veiksmingas būdas išgydyti hepatito virusą yra dviejų vaistų derinys: interferonas-alfa kartu su ribavirinu. Atskirai šie vaistai nėra tokie veiksmingi. Rekomenduojamas vaistų dozavimas ir vartojimo laikas turėtų būti nustatytas tik gydytojo ir atskirai kiekvienam pacientui. Gydymas šiais vaistiniais preparatais gali trukti nuo 6 iki 12 mėnesių.

    Šiandien neišradę narkotikai, garantuojantys 100 procentų išlikimą iš viruso. Tačiau gydant tinkamą gydymą, pacientų gijimas gali siekti iki 90% atvejų skaičiaus.

    Klinikinė hepatito C PCR analizė

    Hepatitas yra rimta liga, turinti daug priežasčių. Jo vystymosi pagrindas yra tiesioginis ar netiesioginis kepenų pažeidimas. Atsižvelgiant į jos svarbą visam organizmui, galima tik atspėti, kaip sudėtinga yra patologija. Šiame straipsnyje mes išsamiai išnagrinėsime hepatito C kurso ypatybes ir laboratorinę diagnostiką.

    Ligos priežastis yra virusinis agentas, kuris nurodo RNR turinčius patogenus. Ji turi skiriamąjį požymį - sugebėjimą keisti, ty keisti savo struktūrą. Dėl to infekcija išsiskiria dėl imuninės sistemos užpuolimo ir dažniausiai sukelia lėtinį kepenų uždegimą.

    Atsižvelgiant į skirtingus viruso potipius, narkotikų atranka turėtų būti grindžiama genotipavimo rezultatais. Nepaisant ilgo ligos ir HCV struktūros tyrimo, iki šiol neįmanoma sukurti konkrečios ligos vakcinos.

    Ankstyvo diagnozavimo sunkumai priklauso nuo asimptominio hepatito eigos, dėl kurio asmuo susipažįsta su gydytoju cirozės stadijoje. Norint laiku nustatyti ligą, būtina reguliariai atlikti medicininius patikrinimus. Tik atliekant kraujo laboratorinius tyrimus galima nustatyti HCV ir užkirsti kelią kitų žmonių užterštumui. Faktas yra tai, kad infekcijos vežėjas ilgą laiką negali atspėti apie patologiją ir toliau perduoti virusą sveikiems žmonėms.

    Perdavimo būdai

    Daugeliu atvejų virusas plinta per kraują, nes jame yra didžiausia patogeninių medžiagų koncentracija. Taigi infekcija yra perduodama:

    • su hemodialize;
    • su infekuota adata;
    • kovos procese, kai oda yra sužeista, ir sąlytis su krauju;
    • su kraujo perpylimu (kraujo perpylimas).

    Infekcijos tikimybė artimumo metu yra nereikšminga, nes sperma ir makšties išskyros turi nedidelį patogenų kiekį. Infekcijos rizika gerokai padidėja pažeidžiant genitalijų gleivinės membraną. Tai pastebima agresyviu ir analiniu seksu.

    Kalbant apie vertikalų perdavimo būdą, tai atliekama darbo proceso metu. Už vaisiaus nėštumo laikotarpį patogenas negali prasiskverbti į placentą į embrioną. Natūralaus gimdymo metu ligos progresuojantis vaistas perduodamas vaikui, kai oda yra sužeista, kai pastebima sąlytis su motinos krauju.

    Po patogenelio įsiskverbimo į sveiką organizmą prasideda antikūnų sintezė, kuri yra apsauga nuo infekcijos ir priklauso imuninėms struktūroms. Jie randami pirminio ELISA tyrimo metu.

    Siekiant patvirtinti paciento diagnozę, atliekama polimerazės grandininė reakcija. Tai patogeninio agento genetinės medžiagos ir virusinės medžiagos nustatymo analizė.

    Laboratorinė hepatito C diagnozė

    Laboratorinė diagnozė prasideda fermento imunologiniu tyrimu. Jo pagrindinė užduotis yra aptikti antikūnus, pagamintus prieš patogeną. Jos efektyvumas yra beveik 95%. Dėl šio tyrimo priešklinikiniame etape galima nustatyti viruso nešiotoją ir išsiųsti jį tolesniam tyrimui.

    ELISA tyrimo kokybinė analizė rodo, kad paciento kraujyje yra ar nėra imunoglobulinų. Jo rezultatas gali būti "teigiamas" arba "neigiamas". Gavęs pirmąjį atsakymą, asmuo siunčiamas į kitą egzaminą - PGR. Jo kaina priklauso nuo reagentų ir laboratorijos kokybės. Polimerazės grandininės reakcijos kaina gali siekti 4 tūkstančius rublių.

    PGR funkcijos

    Naudojant polimerazės grandininę reakciją, netgi nedidelis biologinės medžiagos kiekis leidžia įvertinti viruso apkrovą kraujyje, ty apskaičiuoti patogenų koncentraciją viename mililitre skysčių.

    Po PCR atsiradimo hepatito diagnozė tapo daug lengvesnė. Analizė leidžia nustatyti HCV RNR, nustatyti infekcinio proceso stadiją ir viruso nešiotojo užkrėtimą.

    Yra keletas genetinės diagnozės tipų:

    1. Kokybinė hepatito C PCR analizė - patvirtina HCV buvimą ar jo nebuvimą kraujo subjekte:
    2. kiekybinis, per kurį galite apskaičiuoti virusų koncentraciją ir nustatyti ligos stadiją. Rezultatas pateikiamas TV / ml arba kopijų / ml (priklausomai nuo laboratorijos);
    3. genotipas - būtina nustatyti HCV genotipą. Tai reikalinga tiksliam vaistų pasirinkimui, kuris šiuo atveju bus veiksmingiausias. Analizė netiesiogiai parodo patologinio proceso sunkumą kepenyse. Taigi, trečiuoju patogenezės genotipu dažniausiai pastebima steatozė, kurios pagrindu yra riebalų kaupimasis hepatocitų (jo ląstelėse). Be to, viruso tipas paveikia terapinio kurso baigtį ir trukmę.

    Klinikinė hepatito C PCR analizė

    Visų pirma laboratorijoje tiriama biologinė medžiaga dėl HCV RNR. Svarbu prisiminti, kad kokybinė hepatito C analizė turi tam tikrą jautrumo lygį ir todėl ne visada gali tinkamai atsakyti. Šiuo atveju rekomenduojama pakartotinai atlikti laboratorinę diagnostiką naudojant kitus reagentus.

    Norint gauti patikimus rezultatus, reikėtų naudoti bandymo sistemas, kurių jautris yra ne mažesnis kaip 50 TV / ml.

    Diagnostinis rezultatas gali būti "teigiamas" arba "neigiamas". Jei patogeneko nėra kraujyje, tyrimas baigtas. Jei mėginyje aptinkamas patogeninis agentas, tada kiekybiškai įvertinama viruso apkrova.

    Klaidingas ir neigiamas atsakymas gaunamas, kai yra pažeistas technologinis procesas, pavyzdžiui, aktyvūs komponentai, kurie slopina patogeno genomo kopijų kūrimą, įvedami į terpę. Taigi neįmanoma parodyti tikrą kraujo vaizdą, todėl žmogaus infekcija nėra diagnozuota.

    Klaidingą teigiamą rezultatą galima gauti, jei buvo užterštas biologinės medžiagos surinkimo vamzdis, taip pat tyrimo aplinka. Be to, toks analizės atsakas yra įmanomas su mišriomis infekcijomis, kai kepenis veikia keli virusai, pavyzdžiui, hepatitas C ir D.

    Kokybinio tyrimo indikacijos

    Gydytojas gali skirti pacientui kokybinį hepatito C viruso RNR nustatymo tyrimą:

    • gavus teigiamą ar abejotiną fermento imunologinį atsaką;
    • diagnozės patikrinimui;
    • nustatyti viruso apkrovą;
    • nustatant ligos stadiją;
    • mišrios infekcijos diagnozė. Hepatitas C dažnai infekuoja kepenis vienu metu su "D" virusu;
    • terapinės taktikos nustatymas atsižvelgiant į sukėlėjo genotipą;
    • vertinant pokyčių dinamiką gydymo antivirusiniais vaistiniais preparatais metu.

    Polimerazės grandininės reakcijos privalumai yra šie:

    1. didelis metodikos jautrumas, kuris leidžia nustatyti infekcijos faktą ikiklinikinėje stadijoje;
    2. patogeno genetinės medžiagos identifikavimas, o ne jo antikūnai;
    3. galimybė nustatyti patogeno agento potipį;
    4. didelis diagnostikos greitis, nes nereikalaujama, kad medžiaga būtų sėjama į maistinę terpę, ir pakanka specialių bandymų sistemų. Asmuo gauna rezultatą po 5 valandų;
    5. universalumas. Analizė leidžia nustatyti bet kokią genetinę medžiagą (RNR, DNR). Dėl to gydytojas gali patvirtinti hepatitu C ir kitomis ligos rūšimis (B);
    6. gebėjimas aptikti latentinę infekciją.

    Kiekybiniai tyrimai

    Atliekant kraujo tyrimą, naudojant polimerazės grandininę reakciją, galima apskaičiuoti patogenų skaičių fiksuotoje biologinės medžiagos talpoje. Rodiklis pateikiamas TV / ml. Analizuojant galima nustatyti paciento užkrato laipsnį, nustatyti infekcinio proceso stadiją, taip pat įvertinti vaistų terapijos veiksmingumą.

    Remiantis PGR, specialistas nusprendžia, kokios dozės gali užkirsti kelią patogenų reprodukcijai. Be to, nustatoma antivirusinio gydymo trukmė ir gyvenimo prognozė. Svarbu nepamiršti, kad bandymų sistemos yra labai jautrios, todėl šis metodas leidžia patvirtinti, kad asmuo yra užsikrėtęs ikiklinikinėje stadijoje.

    Genotipas

    Atsižvelgiant į patogenų sugebėjimą mutaciją, jo genotipas yra būtinas norint nustatyti gydymo taktiką ir priešvirusinių vaistų pasirinkimą. Pavyzdžiui, hepatito B HCV 1 gydymas trunka 48 savaites, o teigiama tendencija pastebima tik 60% atvejų. 2 ir 3 genotipai yra palankesnės prognozės. Antivirusiniai vaistai skirti 8 mėnesius, jų veiksmingumas siekia 85%.

    Remiantis statistika, daugeliu atvejų HCV 1, 2 ir 3 registruojamos Rusijos Federacijoje.

    Kai iššifruoja laboratorinį tyrimą, galima atsakyti į šį atsakymą - "nerašytas". Tai reiškia, kad virusas yra cirkuliuojantis paciento kraujotakos sistemoje ir negali būti atpažįstamas bandymo sistemos. Analizės rezultatas šiuo atveju rodo, kad patogenai nėra būdingi tam tikrai geografinei vietovei.

    Kaip gauti patikimus rezultatus?

    Kad būtų galima atlikti kokybinį PGR tyrimą, norint nustatyti hepatito C sukėlėjo RNR, reikia atsižvelgti į paruošimo laboratorinei diagnostikai reikalavimus:

    1. kraujo mėginiai imami tuščiu skrandžiu, o "alkanas" skirtumas neturi būti trumpesnis nei 8 valandos;
    2. dvi dienas prieš tyrimą rekomenduojama nustoti gerti alkoholinius gėrimus ir atsisakyti aštrų, riebių ir rūkytų patiekalų;
    3. panaikinti kraujo krešėjimą mažinančių vaistų, pvz., heparino, įvedimą. Jei šie vaistai skirti dėl sveikatos priežasčių, turite pranešti gydytojui. Be to, specialistas turėtų žinoti apie kitų vaistų, galinčių turėti įtakos laboratorinių tyrimų rezultatams, priėmimą;
    4. Biologinės medžiagos kolekcijos išvakarėse fizioterapijos procedūros neturėtų būti atliekamos, jų neturėtų būti sunkus fizinis krūvis.

    Analizės rezultatus gali įtakoti ne tik kraujo donorystė, bet ir kiti veiksniai, būtent:

    • prastos kokybės kraujo mėginiai;
    • biologinės medžiagos gabenimo rekomendacijų nesilaikymas;
    • nepakankamas laboratorijų darbuotojų mokymas;
    • tyrimo technikos nesilaikymas;
    • antikoaguliantų (heparino) įvedimas kraujo mėginių išvežimo išvakarėse. Ši vaistų grupė mažina krešėjimą, tuo pačiu lėtinant reagentų darbą.

    Skirtingose ​​laboratorijose diagnostikos atsakas gali šiek tiek skirtis, tačiau šios klaidos neturi įtakos galutiniam tyrimo rezultatui.

    Ypatingas dėmesys skiriamas bandymų sistemoms, kurios naudojamos laboratorijoje. Dažnai pirmenybė teikiama jautriems reagentams. Tai svarbu pacientams, turintiems mažą virusų kiekį, nes jų sunku nustatyti.

    Kaip dažnai atliekamas laboratorinis tyrimas?

    Pirminė polimerazės grandininė reakcija atliekama žmonėms, kurie buvo aptikti imunologiniais tyrimais nustatant antikūnus prieš hepatito patogenezę. Šiuo atveju jis yra paskirtas patvirtinti, kad asmuo yra užsikrėtęs ir nustatomas ligos etapas. Be to, analizė leidžia nustatyti viruso potipį, kuris yra ypač svarbus vaistų pasirinkimui.

    Kitas privalomų laboratorinių tyrimų laikotarpis yra 3 mėnesiai nuo antivirusinio gydymo pradžios. Diagnostika leidžia įvertinti vaistų veiksmingumą, koreguoti dozę ar pakeisti.

    Be pagrindinių testų, PGR galima papildomai atlikti 4 ir 24 savaites nuo gydymo pradžios. Teigiamą ligos progresą patvirtina sumažėjęs viruso kiekis po trijų gydymo mėnesių. Pavyzdžiui, jis turėtų sumažėti nuo 1 milijono TV / ml iki kelių šimtų tūkstančių.

    Jei patogeninių agentų koncentracija kraujyje išlieka tokio paties lygio arba šiek tiek padidėja, tai rodo, kad antivirusinių vaistų veiksmingumas yra neveiksmingas ir reikalingas jų pakeitimas. Pasibaigus gydymui naudojant PCR, galima patvirtinti paciento atsigavimą.

    Norint tinkamai interpretuoti laboratorinės diagnostikos rezultatus, reikia konsultuotis su hepatologu arba infekcinės ligos specialistu. Atsižvelgiant į tai, kad ELISA tyrimai dažnai yra klaidingi, analizė naudojama tik pradinei patikrai. Kruopščiau ištyrus paciento naudojamą polimerazės grandininę reakciją.

    Ar galima išgydyti hepatitu C be šalutinio poveikio?

    Šiandien šiuolaikiniai naujosios kartos "Sofosbuvir" ir "Daclatasvir" vaistai greičiausiai gydys hepatitu C 97-100%. Galite įsigyti naujausius vaistus Rusijoje iš oficialaus Indijos farmacijos milžiko Zydus Heptiza atstovo. Užsakyti vaistiniai preparatai bus pristatyti per kurjerį per 4 dienas, apmokėti gavus. Gaukite nemokamą patarimą dėl šiuolaikinių vaistų vartojimo, taip pat sužinokite apie tai, kaip įsigyti galite, oficialioje "Zydus" svetainėje Rusijoje.


    Susiję Straipsniai Hepatito